吻肽素-10 (Kisspeptin-10)

KISS1R，最初稱為GPR54。它位於腦部的GnRH神經元上。缺乏功能性拷貝的人從未開始青春期。

兩者來自同一前驅物。Kisspeptin-54 是長鏈形式；kisspeptin-10 是其最後十個胺基酸，即與受體結合的部分。長鏈形式在血液中持續時間較長。

Kisspeptin 作用於較高一層，即釋放 GnRH 的神經元。Gonadorelin 本身就是 GnRH，作用於腦下垂體。

其 C 端醯胺（最終苯丙胺酸上的 -NH2）是天然激素的一部分，為受體完全活性所必需。其證書顯示了該醯胺。

十瓶冷凍乾燥的 kisspeptin-10 密封瓶，均來自同一批次，每瓶 5 mg 或 10 mg。一份批次報告涵蓋全部十瓶。

Kisspeptin-10 以冷凍乾燥粉末形式裝在密封瓶中運送，在運送過程中於室溫下保持穩定。每份訂單均以簡易包裝寄出並附有追蹤碼，大多數在 7 至 14 天內送達。收到後請儲存在 -20°C 的冷凍庫中。我們目前運送批次的檢驗分析證書可在我們的實驗室結果頁面上找到。

我們的 Kisspeptin-10 純度超過 >98%，經反相 HPLC 驗證，顯示出十肽序列（典型為人類 KP-10 的 Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Phe-NH2）的特徵滯留時間。每批產品均經過全面品質控制：質譜確認分子量（約 1302 Da），驗證完整的十胺基酸序列，包括 C 端醯胺化（對生物活性至關重要，非醯胺化的 kisspeptin 顯示 GPR54 活化顯著降低）；透過 Edman 降解或 MS/MS 片段化進行胜肽定序，驗證每個殘基並確認受體結合所需的保守 C 端 Arg-Phe-NH2 基序；使用表達 GPR54 的細胞（CHO-GPR54、HEK293-GPR54）進行 GPR54 受體結合生物測定，測量 Kisspeptin-10 對放射性標記 kisspeptin 的競爭性置換或鈣離子動員的 IC50/EC50（通常為 1-10 nM，顯示高親和力受體辨識）；功能性 LH 分泌生物測定，處理原代腦下垂體促性腺細胞培養物或完整腦下垂體組織，使用 ELISA/RIA 測量 LH 釋放，量化劑量反應 EC50（奈莫耳範圍）；使用螢光 Ca²⁺ 指示劑（Fluo-4、Fura-2）在表達 GPR54 的細胞中進行鈣離子動員測定，顯示 Kisspeptin-10 劑量依賴性地提高細胞內 Ca²⁺，驗證 Gq-PLC-IP3 路徑活化；受體脫敏測定顯示持續 Kisspeptin-10 暴露會降低反應，而脈衝式給藥則不會（驗證生理脈衝需求）；內毒素檢測（<0.1 EU/mg）；以及全面的檢驗分析證書。

除化學純度（HPLC >98%、質譜確認十肽序列和 C 端醯胺化）外，我們採用全面的 GPR54 受體和功能性驗證：(1) C 端醯胺化驗證：質譜精確測量分子量（醯胺化約 1302 Da，游離酸約 1303 Da），確認 -NH2 存在對生物活性至關重要。(2) GPR54 結合試驗：使用穩定表現人類 GPR54 之細胞（CHO-GPR54、HEK293-GPR54），測量 Kisspeptin-10 對放射性標記 kisspeptin（[125I]-kisspeptin）或螢光配體之競爭性置換，測定 IC50（通常 1-10 nM），確認高親和力受體辨識。(3) 鈣流動測定：以劑量遞增之 Kisspeptin-10 處理表現 GPR54 之細胞，透過 Fluo-4 或 Fura-2 螢光即時測量細胞內 Ca²⁺ 升高，定量 EC50（奈莫爾範圍），證明 Gq 蛋白介導之 PLC-IP3-Ca²⁺ 路徑活化，進而偶聯 GnRH 分泌。(4) LH 分泌生物測定：關鍵功能性驗證，以 Kisspeptin-10 處理初代垂體促性腺細胞培養或垂體組織外植體，透過 ELISA 或 RIA 測量培養基中 LH 釋放，證明劑量依賴性 LH 分泌並定量 EC50，驗證 GPR54 活化至荷爾蒙輸出之轉譯。(5) ERK1/2 磷酸化：西方墨點法顯示 Kisspeptin-10 在表現 GPR54 之細胞中活化 MAPK 路徑。(6) 受體脫敏動力學：證明持續 Kisspeptin-10 暴露降低鈣反應，相較於脈衝式給藥，驗證脈衝刺激之生理需求。(7) 選擇性對照：顯示 Kisspeptin-10 活化表現 GPR54 之細胞，但不活化缺乏受體之母細胞，確認受體介導效應。(8) 非醯胺化比較：若可用，證明醯胺化 Kisspeptin-10-NH2 之效力比 Kisspeptin-10-OH 高 100 至 1000 倍，驗證醯胺化之重要性。