เฮกซาเรลิน อะซิเตต (Hexarelin Acetate)

นอกจากตัวรับ ghrelin แล้ว hexarelin ยังจับกับ CD36 ซึ่งเป็นตัวรับในเนื้อเยื่อหัวใจ ในหนูทดลองหลังเกิดภาวะหัวใจวาย hexarelin ช่วยรักษาการทำงานของหัวใจและลดรอยแผลเป็น ซึ่งเป็นผลที่ได้รับการศึกษาแยกจากการหลั่งฮอร์โมนการเจริญเติบโต

Hexarelin คือ GHRP-6 ที่มีทริปโตเฟนเมทิลเลตหนึ่งตัว การเปลี่ยนแปลงนี้ทำให้เป็นตัวกระตุ้นการหลั่งฮอร์โมนการเจริญเติบโตที่แรงกว่า โดยมีผลข้างเคียงเรื่องความหิวที่รุนแรงน้อยกว่า GHRP-6

ใช่ ในการศึกษา 16 สัปดาห์ในผู้สูงอายุ การตอบสนองของฮอร์โมนการเจริญเติบโตลดลงเมื่อใช้ซ้ำ นักวิจัยเรียกปรากฏการณ์นี้ว่าการลดความไว (desensitisation)

ไม่ Hexarelin ได้รับการศึกษาในมนุษย์แต่ไม่เคยได้รับการอนุมัติให้เป็นยา Lyze จัดหาเพื่อการวิจัยในห้องปฏิบัติการเท่านั้น

ขวดปิดผนึก 10 ขวดที่บรรจุ hexarelin acetate แบบแห้งเยือกแข็งจากล็อตเดียวกัน โดยมีขนาด 2 mg หรือ 5 mg ต่อขวด รายงานล็อตหนึ่งฉบับครอบคลุมทั้ง 10 ขวด

Hexarelin Acetate จัดส่งเป็นผงแห้งเยือกแข็งในขวดปิดผนึก ซึ่งคงความเสถียรที่อุณหภูมิห้องระหว่างการขนส่ง คำสั่งซื้อทั้งหมดจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ธรรมดาพร้อมหมายเลขติดตาม และส่วนใหญ่จะถึงภายใน 7 ถึง 14 วัน เมื่อได้รับแล้วให้เก็บในช่องแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20°C ใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) สำหรับล็อตที่กำลังจัดส่งอยู่ในขณะนี้อยู่ที่หน้า lab-results ของเรา

Hexarelin Acetate ของเรามีความบริสุทธิ์มากกว่า >98% ซึ่งได้รับการยืนยันโดย reverse-phase HPLC ที่แสดงเวลา retention time ที่เป็นลักษณะเฉพาะของลำดับ hexapeptide His-D-2-methyl-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 แต่ละล็อตผ่านการควบคุมคุณภาพอย่างครอบคลุม: การยืนยันมวลโมเลกุลด้วย mass spectrometry (~887 Da สำหรับ acetate salt) ซึ่งยืนยันลำดับทั้งหมดรวมถึง D-2-methyl-tryptophan (กรดอะมิโนผิดปกติที่สำคัญต่อศักยภาพสูง), การ amidation ที่ปลาย C, และ acetate counterion, การจัดลำดับเปปไทด์ด้วย Edman degradation หรือ MS/MS fragmentation ซึ่งยืนยันกรดอะมิโนแต่ละตัวและสเตอริโอเคมีที่ยืนยันการกำหนดค่าของ D-2-methyl-Trp และ D-Phe ซึ่งจำเป็นต่อการเลือกจับและศักยภาพของ GHSR1a, การทดสอบการจับตัวรับ GHSR1a (binding bioassays) โดยใช้เซลล์ที่แสดงตัวรับ ghrelin เพื่อวัดการแย่งจับของ Hexarelin กับ ghrelin พร้อมการวัดค่า IC50 (โดยทั่วไปมี affinity 0.1-10 nM ซึ่งแสดงถึงการจับที่มีศักยภาพสูง), การทดสอบการหลั่ง GH (functional GH secretion assays) โดยการรักษา primary pituitary somatotroph cultures ด้วย Hexarelin ในขนาดที่เพิ่มขึ้นเพื่อวัดการปล่อย GH ด้วย ELISA/chemiluminescence ซึ่งวัดค่า EC50 potency (ช่วง picomolar ถึง low nanomolar ซึ่งมีศักยภาพสูงกว่า GHRP-6 10-100 เท่า ซึ่งยืนยันฤทธิ์ทางชีวภาพที่โดดเด่น), การทดสอบการจับ CD36 (CD36 binding assays) โดยใช้ cardiomyocytes หรือเซลล์ที่แสดง CD36 เพื่อยืนยันการรับรู้ตัวรับแบบคู่นอกเหนือจาก GHSR1a, การทดสอบฤทธิ์ป้องกันหัวใจ (cardioprotective bioassays) โดยวัดการมีชีวิตของ cardiomyocytes ภายใต้ภาวะเครียดออกซิเดชัน (การรักษาด้วย H2O2) หรือภาวะขาดออกซิเจน ซึ่งแสดงผลการป้องกันของ Hexarelin ผ่านการทดสอบ MTT/LDH, การทดสอบการเคลื่อนที่ของแคลเซียม (calcium mobilization assays) ซึ่งแสดงการกระตุ้นวิถี Gq-PLC-IP3-Ca2+, การทดสอบเอนโดทอกซิน (<0.1 EU/mg), และใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) ที่ครอบคลุม

นอกเหนือจากความบริสุทธิ์ทางเคมี (HPLC >98%, แมสสเปกตรัมยืนยันเฮกซาเปปไทด์ที่มี D-2-methyl-Trp พร้อม amidation) เรายังใช้การตรวจสอบศักยภาพและฤทธิ์อย่างครอบคลุม: (1) การจับ GHSR1a ความสัมพันธ์สูง - การทดสอบการแทนที่แบบแข่งขันโดยใช้เซลล์ที่แสดงตัวรับ ghrelin วัดค่า IC50 โดยทั่วไป 0.1-10 nM (ความสัมพันธ์สูงกว่า GHRP-6 10-100 เท่า) ยืนยันการรับรู้ตัวรับที่ยอดเยี่ยม (2) การทดสอบทางชีวภาพการหลั่ง GH ที่มีศักยภาพสูง - การรักษาเซลล์ somatotroph ต่อมใต้สมองปฐมภูมิด้วยความเข้มข้น Hexarelin ระดับพิโคโมลาร์ถึงนาโนโมลาร์ วัดการหลั่ง GH ด้วย ELISA/เคมีเรืองแสงที่ไวสูง วัดค่า EC50 (โดยทั่วไปช่วง 10-1000 พิโคโมลาร์) แสดงศักยภาพมากกว่า GHRP อื่น 10-100 เท่า ยืนยันการมีส่วนร่วมของ D-2-methyl-Trp (3) การเปรียบเทียบกราฟขนาด-ตอบสนอง - การทดสอบแบบเคียงข้างกันของ Hexarelin กับ GHRP-6 และ Ipamorelin แสดงการเลื่อนซ้ายของกราฟ Hexarelin (EC50 ต่ำกว่า) ยืนยันศักยภาพที่เหนือกว่า (4) การทดสอบการจับ CD36 - ใช้ cardiomyocytes, เซลล์บุผนังหลอดเลือด หรือ CD36 รีคอมบิแนนท์ วัดการจับ Hexarelin ผ่านการทดสอบการแข่งขันหรือ surface plasmon resonance แสดงการรับรู้ตัวรับคู่ (5) การทดสอบทางชีวภาพการป้องกันหัวใจ - รักษา cardiomyocytes ด้วย H2O2 (ความเครียดออกซิเดชัน), ภาวะขาดออกซิเจน หรือ ischemia-reperfusion และวัดความมีชีวิต (การทดสอบ MTT), การปล่อย LDH (ความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์), กิจกรรม caspase-3 (apoptosis) และการสร้าง ROS แสดงให้เห็นว่า Hexarelin ลดการบาดเจ็บตามขนาด (6) การผลิตไนตริกออกไซด์ - วัด phosphorylation ของ eNOS ผ่าน Western blot และการปล่อย NO (ฟลูออเรสเซนซ์ DAF หรือการทดสอบ Griess) ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดยืนยันการกระตุ้นเส้นทาง CD36-PI3K-AKT-eNOS (7) การทดสอบการป้องกันไมโตคอนเดรีย - วัดศักย์เยื่อไมโตคอนเดรีย (สีย้อม JC-1), การสร้าง ROS (ฟลูออเรสเซนซ์ DHE) และการผลิต ATP แสดงให้เห็นว่า Hexarelin รักษาการทำงานของไมโตคอนเดรียภายใต้ความเครียด (8) การตรวจสอบความเป็นอิสระจาก GH - แสดงให้เห็นว่าการป้องกันหัวใจยังคงอยู่กับตัวต้าน GHSR1a หรือในเซลล์ที่ขาด GHSR1a ยืนยันผลที่อาศัย CD36