LL37

Он состоит из 37 аминокислот, и первые две из них – лейцины (L и L). Он отщепляется от более крупного белка под названием hCAP18.

Его спиральная форма имеет заряженную сторону и жирную сторону. Он прилипает к бактериальным мембранам, которые несут более отрицательный заряд, чем клетки человека, и пробивает в них дыры.

В лабораторных исследованиях он разрушает биопленки – защитные пленки, которые строят бактерии, и предотвращает образование новых.

Десять герметичных флаконов лиофилизированного LL-37 по 5 мг каждый, все из одной партии. Один отчет о партии распространяется на все десять.

Храните запечатанные флаконы при -20°C. После разведения храните при 2-8°C и используйте в течение 14 дней.

LL-37 поставляется в виде лиофилизированного порошка в герметичных флаконах, который остается стабильным при комнатной температуре во время транспортировки. Каждый заказ отправляется в простой упаковке с отслеживанием, и большинство заказов прибывают в течение 7-14 дней. После получения храните в морозильной камере при -20°C. Сертификат анализа на партию, которую мы отправляем сейчас, находится на нашей странице lab-results.

Наш LL37 имеет чистоту >98%, подтвержденную обращенно-фазовой ВЭЖХ, демонстрирующей характерное время удерживания для последовательности кателицидина из 37 аминокислот. Каждая партия проходит всесторонний контроль качества: подтверждение молекулярной массы (~4493 Da) методом масс-спектрометрии, подтверждающее полную последовательность Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser; секвенирование пептидов с помощью фрагментации МС/МС или деградации по Эдману, подтверждающее каждую аминокислоту (особое внимание уделяется 6 остаткам Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu, критически важным для структуры и активности антимикробного пептида); анализ аминокислотного состава с количественным определением каждого остатка, подтверждающий точность последовательности и общий заряд +6; функциональные биоанализы, измеряющие антимикробную активность, включая анализы на уничтожение бактерий с использованием грамположительных (S. aureus ATCC 25923, включая штаммы MRSA) и грамотрицательных (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) бактерий, выращенных до логарифмической фазы и обработанных возрастающими дозами LL37 в течение 1-3 часов с измерением снижения колониеобразующих единиц (КОЕ), демонстрирующие дозозависимое уничтожение с количественным определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК) и минимальной бактерицидной концентрации (МБК) (типичные диапазоны МИК 0.5-8 μg/mL в зависимости от штамма); кинетика уничтожения во времени, показывающая быструю бактерицидную активность (<1 часа для большинства штаммов); валидация спектра действия в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий; анализы противогрибковой активности с использованием C. albicans, демонстрирующие противогрибковую активность; анализы нарушения мембран с использованием поглощения йодида пропидия, окрашивания SYTOX Green или высвобождения лактатдегидрогеназы, подтверждающие, что LL37 вызывает пермеабилизацию мембраны; анализы разрушения биопленок, показывающие, что LL37 уменьшает предварительно сформированные биопленки P. aeruginosa или S. aureus, измеренные с помощью окрашивания кристаллическим фиолетовым или метаболической активности (восстановление XTT); анализы хемотаксической активности, демонстрирующие, что LL37 привлекает нейтрофилы или моноциты с помощью анализов миграции в трансвеллах с количественной оценкой дозозависимости; анализы модуляции цитокинов при обработке PBMC или макрофагов LL37 +/- LPS с измерением индукции IL-8 и модуляции TNF-α с помощью ELISA; анализы нейтрализации эндотоксина, показывающие, что LL37 ингибирует активацию NF-κB или продукцию цитокинов, индуцированную LPS; спектроскопия кругового дихроизма (КД), подтверждающая образование α-спиральной структуры в мембрано-миметических средах (мицеллы SDS, фосфолипидные везикулы) с количественным определением содержания спиралей; тестирование на эндотоксины (<0.1 EU/mg с помощью LAL-теста, что критически важно для LL37, поскольку он используется в исследованиях, связанных с LPS); и всесторонний Сертификат анализа. Обращение с катионными пептидами: положительный заряд LL37 может вызывать неспецифическое связывание с отрицательно заряженными поверхностями (стекло, некоторые виды пластика); мы рекомендуем использовать пробирки с низким связыванием и добавлять белки-носители (0.1% BSA) в рабочие растворы при низких концентрациях для предотвращения потерь из-за адсорбции на поверхности.