LL37

Elle contient 37 acides aminés, et les deux premiers sont des leucines (L et L). Elle est issue du clivage d'une protéine plus grande appelée hCAP18.

Sa forme en hélice possède un côté chargé et un côté huileux. Elle se fixe aux membranes bactériennes, qui portent une charge négative plus importante que les cellules humaines, et y perce des trous.

Dans les études en laboratoire, elle dégrade les biofilms, les films protecteurs que les bactéries construisent, et empêche la formation de nouveaux biofilms.

Dix flacons scellés de LL-37 lyophilisée, 5 mg chacun, tous issus d'un même lot. Un seul rapport de lot couvre les dix flacons.

Conservez les flacons scellés à -20°C. Une fois reconstituée, conservez-la entre 2 et 8°C et utilisez-la dans les 14 jours.

LL37 est expédiée sous forme de poudre lyophilisée dans des flacons scellés, qui reste stable à température ambiante pendant le transport. Chaque commande est envoyée dans un emballage discret avec suivi, et la plupart arrivent sous 7 à 14 jours. Conservez-la au congélateur à -20°C dès réception. Le certificat d'analyse du lot que nous expédions actuellement se trouve sur notre page de résultats de laboratoire.

Notre LL37 dépasse >98 % de pureté vérifiée par HPLC en phase inverse démontrant un temps de rétention caractéristique de la séquence de cathelicidine de 37 acides aminés. Chaque lot fait l'objet d'un contrôle qualité complet : confirmation par spectrométrie de masse du poids moléculaire (~4493 Da) validant la séquence complète Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser, séquençage peptidique par fragmentation MS/MS ou dégradation d'Edman vérifiant chaque acide aminé (attention particulière aux 6 résidus Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu critiques pour la relation structure-activité antimicrobienne), analyse de la composition en acides aminés quantifiant chaque résidu confirmant la fidélité de la séquence et la charge nette +6, tests fonctionnels mesurant l'activité antimicrobienne incluant des tests de bactéricidie utilisant des bactéries Gram-positives (S. aureus ATCC 25923, y compris les souches MRSA) et Gram-négatives (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) cultivées en phase logarithmique et traitées avec des doses croissantes de LL37 pendant 1 à 3 heures mesurant la réduction des unités formant colonies (UFC) démontrant une bactéricidie dose-dépendante avec quantification de la concentration minimale inhibitrice (CMI) et de la concentration minimale bactéricide (CMB) (plages de CMI typiques de 0,5 à 8 μg/mL selon la souche), cinétique de bactéricidie montrant une activité bactéricide rapide (<1 heure pour la plupart des souches), validation du spectre Gram-positif vs Gram-négatif, tests d'activité fongique utilisant C. albicans démontrant la puissance antifongique, tests de perturbation membranaire utilisant l'absorption d'iodure de propidium, la coloration SYTOX Green ou le dosage de la lactate déshydrogénase confirmant que LL37 provoque la perméabilisation membranaire, tests de perturbation des biofilms montrant que LL37 réduit les biofilms préformés de P. aeruginosa ou S. aureus mesurés par coloration au cristal violet ou activité métabolique (réduction XTT), tests d'activité chimiotactique démontrant que LL37 recrute les neutrophiles ou monocytes à l'aide de tests de migration en chambre de Transwell avec quantification dose-réponse, tests de modulation des cytokines traitant des PBMC ou des macrophages avec LL37 +/- LPS mesurant l'induction d'IL-8 et la modulation du TNF-α par ELISA, tests de neutralisation des endotoxines montrant que LL37 inhibe l'activation de NF-κB ou la production de cytokines induites par LPS, spectroscopie de dichroïsme circulaire (CD) confirmant la formation de structure α-hélicoïdale dans des environnements mimant les membranes (micelles SDS, vésicules phospholipidiques) avec quantification du contenu hélicoïdal, test d'endotoxines (<0,1 EU/mg par test LAL - critique pour LL37 car elle est utilisée dans la recherche liée au LPS), et certificat d'analyse complet. Manipulation des peptides cationiques : la charge positive de LL37 peut provoquer une liaison non spécifique aux surfaces chargées négativement (verre, certains plastiques) ; nous recommandons d'utiliser des tubes à faible liaison et d'inclure des protéines porteuses (BSA à 0,1 %) dans les solutions de travail pour les concentrations diluées afin d'éviter les pertes par adsorption de surface.