LL37

Він складається з 37 амінокислот, і перші дві – це лейцини (L та L). Він вирізаний з більшого білка під назвою hCAP18.

Його спіральна форма має заряджену сторону та маслянисту сторону. Він прилипає до бактеріальних мембран, які несуть більше негативного заряду, ніж клітини людини, і пробиває в них дірки.

У лабораторних дослідженнях він руйнує біоплівки, захисні плівки, які утворюють бактерії, і запобігає утворенню нових.

Десять герметичних флаконів ліофілізованого LL-37 по 5 мг кожен, всі з однієї партії. Один звіт про партію охоплює всі десять.

Зберігайте герметичні флакони при температурі -20°C. Після розведення зберігайте при температурі від 2 до 8°C та використовуйте протягом 14 днів.

LL-37 доставляється у вигляді ліофілізованого порошку в герметичних флаконах, який залишається стабільним при кімнатній температурі під час транспортування. Кожне замовлення відправляється у звичайній упаковці з відстеженням, і більшість прибуває протягом 7-14 днів. Після отримання зберігайте в морозильній камері при -20°C. Сертифікат аналізу на партію, яку ми зараз відправляємо, знаходиться на нашій сторінці з результатами лабораторних досліджень.

Наш LL-37 перевищує чистоту >98%, підтверджену обернено-фазовою ВЕРХ, що демонструє характерний час утримування для послідовності кателіцидину з 37 амінокислот. Кожна партія проходить комплексний контроль якості: підтвердження молекулярної маси мас-спектрометрією (~4493 Да), що підтверджує повну послідовність Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser; секвенування пептиду за допомогою фрагментації МС/МС або деградації за Едманом, що підтверджує кожну амінокислоту (особлива увага до 6 залишків Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu, критичних для структури та активності антимікробного пептиду); аналіз амінокислотного складу з кількісним визначенням кожного залишку, що підтверджує вірність послідовності та загальний заряд +6; функціональні біоаналізи, що вимірюють антимікробну активність, включаючи аналізи на вбивання бактерій з використанням грампозитивних (S. aureus ATCC 25923, включаючи штами MRSA) та грамнегативних (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) бактерій, вирощених до логарифмічної фази та оброблених зростаючими дозами LL-37 протягом 1-3 годин з вимірюванням зниження колонієутворюючих одиниць (КУО), що демонструє дозозалежне вбивання з кількісним визначенням мінімальної інгібуючої концентрації (МІК) та мінімальної бактерицидної концентрації (МБК) (типові діапазони МІК 0.5-8 мкг/мл залежно від штаму); кінетика вбивання в часі, що показує швидку бактерицидну активність (<1 години для більшості штамів); валідація спектру дії проти грампозитивних та грамнегативних бактерій; аналізи протигрибкової активності з використанням C. albicans, що демонструють протигрибкову активність; аналізи порушення мембран з використанням поглинання йодиду пропідію, фарбування SYTOX Green або вивільнення лактатдегідрогенази, що підтверджують, що LL-37 викликає пермеабілізацію мембран; аналізи руйнування біоплівок, що показують, що LL-37 зменшує попередньо сформовані біоплівки P. aeruginosa або S. aureus, виміряні за допомогою фарбування кристалічним фіолетовим або метаболічної активності (відновлення XTT); аналізи хемотаксичної активності, що демонструють, що LL-37 залучає нейтрофіли або моноцити з використанням аналізів міграції в трансвелах з кількісним визначенням дозозалежної відповіді; аналізи модуляції цитокінів, що включають обробку PBMC або макрофагів LL-37 +/- LPS з вимірюванням індукції IL-8 та модуляції TNF-α за допомогою ІФА; аналізи нейтралізації ендотоксину, що показують, що LL-37 інгібує активацію NF-κB або продукцію цитокінів, індуковану LPS; спектроскопія кругового дихроїзму (КД), що підтверджує утворення α-спіральної структури в мембрано-міметичних середовищах (міцели SDS, фосфоліпідні везикули) з кількісним визначенням вмісту спіралей; тестування на ендотоксин (<0.1 EU/мг за допомогою LAL-аналізу, що критично для LL-37, оскільки він використовується в дослідженнях, пов'язаних з LPS); та комплексний Сертифікат аналізу. Поводження з катіонними пептидами: позитивний заряд LL-37 може спричиняти неспецифічне зв'язування з негативно зарядженими поверхнями (скло, деякі види пластику); ми рекомендуємо використовувати пробірки з низьким зв'язуванням та додавати білки-носії (0.1% BSA) в робочі розчини для низьких концентрацій, щоб запобігти втратам через адсорбцію на поверхні.