LL37

يتكون من 37 حمضًا أمينيًا، وأول اثنين منهما هما الليوسين (L و L). يُشتق من بروتين أكبر يُسمى hCAP18.

شكله الحلزوني له جانب مشحون وجانب زيتي. يلتصق بالأغشية البكتيرية، التي تحمل شحنة سالبة أكبر من الخلايا البشرية، ويُحدث ثقوبًا فيها.

في الدراسات المختبرية، يُفكك الأغشية الحيوية، وهي الأغشية الواقية التي تبنيها البكتيريا، ويمنع تكوّن أغشية جديدة.

عشر قوارير محكمة الإغلاق من LL-37 المجفف بالتجميد، كل منها 5 mg، جميعها من دفعة واحدة. يغطي تقرير دفعة واحدة جميع القوارير العشر.

احفظ القوارير محكمة الإغلاق عند -20°C. بمجرد خلطه، احفظه عند درجة حرارة من 2 إلى 8°C واستخدمه خلال 14 يومًا.

يُشحن LL37 كمسحوق مجفف بالتجميد في قوارير محكمة الإغلاق، ويظل مستقرًا في درجة حرارة الغرفة أثناء الرحلة. تُرسل كل طلبية في تغليف عادي مع إمكانية التتبع، وتصل معظمها في غضون 7 إلى 14 يومًا. قم بتخزينه في المجمد عند -20°C فور وصوله. شهادة التحليل للدفعة التي نشحنها حاليًا موجودة على صفحة نتائج المختبر الخاصة بنا.

يتجاوز LL37 الخاص بنا >98% نقاءً تم التحقق منه بواسطة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) ذات الطور العكسي والتي تُظهر زمن احتجاز مميز لتسلسل الكاثيليسيدين المكون من 37 حمضًا أمينيًا. تخضع كل دفعة لمراقبة جودة شاملة: تأكيد الوزن الجزيئي (~4493 Da) بواسطة مطياف الكتلة للتحقق من التسلسل الكامل (Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser)، وتسلسل الببتيد عبر تجزئة MS/MS أو تحليل إدمان للتحقق من كل حمض أميني (مع اهتمام خاص ببقايا 6 Lys و 6 Arg و 4 Phe و 3 Leu الحاسمة للنشاط الهيكلي المضاد للميكروبات)، وتحليل تكوين الأحماض الأمينية لقياس كل بقايا وتأكيد دقة التسلسل والشحنة الصافية +6، واختبارات وظيفية حيوية لقياس النشاط المضاد للميكروبات بما في ذلك اختبارات قتل البكتيريا باستخدام بكتيريا إيجابية الجرام (S. aureus ATCC 25923، بما في ذلك سلالات MRSA) وسالبة الجرام (E. coli ATCC 25922، P. aeruginosa PAO1) تمت زراعتها حتى الطور اللوغاريتمي ومعالجتها بجرعات متصاعدة من LL37 لمدة 1-3 ساعات لقياس انخفاض وحدات تكوين المستعمرات (CFU) مما يُظهر قتلًا يعتمد على الجرعة مع قياس التركيز المثبط الأدنى (MIC) والتركيز القاتل الأدنى (MBC) (نطاقات MIC النموذجية 0.5-8 μg/mL حسب السلالة)، وحركيات القتل الزمنية التي تُظهر نشاطًا مبيدًا سريعًا (<1 ساعة لمعظم السلالات)، والتحقق من طيف النشاط ضد البكتيريا إيجابية وسالبة الجرام، واختبارات النشاط الفطري باستخدام C. albicans لإظهار الفعالية المضادة للفطريات، واختبارات تعطيل الغشاء باستخدام امتصاص يوديد البروبيديوم أو صبغة SYTOX Green أو إطلاق نازعة هيدروجين اللاكتات لتأكيد أن LL37 يُسبب نفاذية الغشاء، واختبارات تعطيل الأغشية الحيوية التي تُظهر أن LL37 يُقلل الأغشية الحيوية المُشكّلة مسبقًا لـ P. aeruginosa أو S. aureus المقاسة بصبغة البنفسج البلوري أو النشاط الأيضي (اختزال XTT)، واختبارات النشاط الكيميائي الجاذب التي تُظهر أن LL37 يجذب العدلات أو الخلايا الوحيدة باستخدام اختبارات الهجرة عبر الغشاء مع قياس الاستجابة للجرعة، واختبارات تعديل السيتوكين بمعالجة PBMCs أو الخلايا البلعمية بـ LL37 +/- LPS وقياس تحريض IL-8 وتعديل TNF-α عبر ELISA، واختبارات تحييد الذيفان الداخلي التي تُظهر أن LL37 يثبط تنشيط NF-κB أو إنتاج السيتوكين المُحفّز بـ LPS، وقياس الاستقطاب الدائري (CD) لتأكيد تكوين البنية الحلزونية ألفا في بيئات محاكية للغشاء (مذيلات SDS، حويصلات فوسفوليبيدية) مع قياس المحتوى الحلزوني، واختبار الذيفان الداخلي (<0.1 EU/mg عبر اختبار LAL - وهو أمر بالغ الأهمية لـ LL37 لأنه يُستخدم في الأبحاث المتعلقة بـ LPS)، وشهادة تحليل شاملة. التعامل مع الببتيدات الكاتيونية: يمكن للشحنة الموجبة لـ LL37 أن تُسبب ارتباطًا غير نوعي بالأسطح سالبة الشحنة (الزجاج، بعض المواد البلاستيكية)؛ نوصي باستخدام أنابيب منخفضة الارتباط وتضمين بروتينات حاملة (0.1% BSA) في المحاليل العاملة للتركيزات المخففة لمنع فقدان الامتصاص السطحي.