LL37

37 amino asit içerir ve ilk ikisi lösin (L ve L)dir. hCAP18 adlı daha büyük bir proteinden kesilir.

Sarmal şeklinin yüklü bir tarafı ve yağlı bir tarafı vardır. İnsan hücrelerinden daha fazla negatif yük taşıyan bakteri zarlarına yapışır ve içlerinde delikler açar.

Laboratuvar çalışmalarında, bakterilerin oluşturduğu koruyucu filmler olan biyofilmleri parçalar ve yenilerinin oluşmasını engeller.

Her biri 5 mg olan, tek bir partiden on adet mühürlü liyofilize LL-37 flakonu. Tek bir parti raporu on flakonun tamamını kapsar.

Mühürlü flakonları -20°C'de saklayın. Karıştırıldıktan sonra 2 ila 8°C arasında saklayın ve 14 gün içinde kullanın.

LL37, yolculuk boyunca oda sıcaklığında stabil kalan, mühürlü flakonlarda liyofilize toz olarak gönderilir. Her sipariş, takip numarasıyla birlikte sade ambalajda gönderilir ve çoğu 7 ila 14 gün içinde teslim edilir. Geldiğinde dondurucuda -20°C'de saklayın. Şu anda göndermekte olduğumuz partiye ait Analiz Sertifikası, laboratuvar sonuçları sayfamızdadır.

LL37'miz, 37 amino asitli katelisidin dizisine özgü alıkonma süresini gösteren ters fazlı HPLC ile doğrulanmış >%98 saflığı aşmaktadır. Her parti kapsamlı kalite kontrolünden geçer: tam Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser dizisini doğrulayan moleküler ağırlık (~4493 Da) teyidi için kütle spektrometrisi, her bir amino asidi doğrulayan MS/MS parçalanması veya Edman bozunması yoluyla peptit dizileme (antimikrobiyal yapı-aktivite için kritik olan 6 Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu kalıntılarına özel dikkat), dizi aslına uygunluğunu ve net yük +6'yı doğrulayan her bir kalıntıyı ölçen amino asit kompozisyon analizi, Gram-pozitif (S. aureus ATCC 25923, MRSA suşları dahil) ve Gram-negatif (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) bakteriler kullanılarak log fazında kültüre edilen ve 1-3 saat boyunca artan dozda LL37 ile muamele edilen bakteri öldürme testleri dahil antimikrobiyal aktiviteyi ölçen fonksiyonel biyolojik testler, koloni oluşturan birim (CFU) azalmasını ölçerek doza bağlı öldürmeyi ve minimum inhibitör konsantrasyon (MIC) ile minimum bakterisidal konsantrasyon (MBC) ölçümünü (tipik MIC aralıkları suşa bağlı olarak 0.5-8 μg/mL) gösteren, hızlı bakterisidal aktiviteyi (<1 saat çoğu suş için) gösteren zaman-öldürme kinetiği, Gram-pozitif vs Gram-negatif spektrum validasyonu, antifungal gücü gösteren C. albicans kullanılarak yapılan fungal aktivite testleri, propiyum iyodür alımı, SYTOX Green boyaması veya laktat dehidrogenaz salınımı kullanılarak LL37'nin membran geçirgenliğine neden olduğunu doğrulayan membran bozma testleri, kristal viyole boyaması veya metabolik aktivite (XTT redüksiyonu) ile ölçülen LL37'nin önceden oluşmuş P. aeruginosa veya S. aureus biyofilmlerini azalttığını gösteren biyofilm bozma testleri, doz-yanıt ölçümü ile transwell migrasyon testleri kullanarak LL37'nin nötrofil veya monositleri çektiğini gösteren kemotaktik aktivite testleri, PBMC'ler veya makrofajların LL37 +/- LPS ile muamele edilip ELISA yoluyla IL-8 indüksiyonu ve TNF-α modülasyonunun ölçüldüğü sitokin modülasyon testleri, LL37'nin LPS kaynaklı NF-κB aktivasyonunu veya sitokin üretimini inhibe ettiğini gösteren endotoksin nötralizasyon testleri, membran-mimetik ortamlarda (SDS miselleri, fosfolipit veziküller) α-helikal yapı oluşumunu doğrulayan ve helikal içeriği ölçen dairesel dikroizm (CD) spektroskopisi, endotoksin testi (LAL testi ile <0.1 EU/mg - LL37 için kritiktir çünkü LPS ile ilgili araştırmalarda kullanılır) ve kapsamlı Analiz Sertifikası. Katyonik peptit kullanımı: LL37'nin pozitif yükü, negatif yüklü yüzeylere (cam, bazı plastikler) spesifik olmayan bağlanmaya neden olabilir; yüzey adsorpsiyon kayıplarını önlemek için düşük bağlanmalı tüpler kullanmanızı ve seyreltik konsantrasyonlarda çalışma solüsyonlarına taşıyıcı proteinler (%0.1 BSA) eklemenizi öneririz.