LL37

Het heeft 37 aminozuren, en de eerste twee zijn leucines (L en L). Het wordt afgesplitst van een groter eiwit genaamd hCAP18.

De spiraalvorm heeft een geladen zijde en een vettige zijde. Het hecht zich aan bacteriële membranen, die een meer negatieve lading dragen dan menselijke cellen, en maakt er gaten in.

In laboratoriumstudies breekt het biofilms af, de beschermende films die bacteriën opbouwen, en voorkomt het dat er nieuwe worden gevormd.

Tien verzegelde flacons met gevriesdroogd LL-37, elk 5 mg, allemaal uit één batch. Eén batchrapport dekt alle tien.

Bewaar de verzegelde flacons bij -20°C. Na reconstitutie bewaart u het bij 2 tot 8°C en gebruikt u het binnen 14 dagen.

LL37 wordt verzonden als gevriesdroogd poeder in verzegelde flacons, dat stabiel blijft bij kamertemperatuur tijdens de reis. Elke bestelling gaat in neutrale verpakking met tracking, en de meeste komen binnen 7 tot 14 dagen aan. Bewaar het in de vriezer bij -20°C zodra het aankomt. Het analysecertificaat voor de batch die we nu verzenden, staat op onze labresultatenpagina.

Ons LL37 overschrijdt >98% zuiverheid, geverifieerd door omgekeerde-fase HPLC die een retentietijd laat zien die kenmerkend is voor de 37-aminozuur-cathelicidine-sequentie. Elke batch ondergaat uitgebreide kwaliteitscontrole: massaspectrometrische bevestiging van molecuulgewicht (~4493 Da) ter validatie van de volledige Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser-sequentie, peptidesequencing via MS/MS-fragmentatie of Edman-afbraak ter verificatie van elk aminozuur (speciale aandacht voor 6 Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu-residuen die cruciaal zijn voor antimicrobiële structuur-activiteit), aminozuursamenstellingsanalyse die elk residu kwantificeert en de sequentietrouw en netto lading +6 bevestigt, functionele bioassays die antimicrobiële activiteit meten, waaronder bacteriële dodingsassays met Gram-positieve (S. aureus ATCC 25923, inclusief MRSA-stammen) en Gram-negatieve (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) bacteriën gekweekt tot log-fase en behandeld met oplopende doses LL37 gedurende 1-3 uur, waarbij de reductie van kolonievormende eenheden (CFU) wordt gemeten, wat dosisafhankelijke doding aantoont met kwantificering van minimale remmende concentratie (MIC) en minimale bactericide concentratie (MBC) (typische MIC-bereiken 0,5-8 μg/mL afhankelijk van de stam), tijd-dodingskinetiek die snelle bactericide activiteit laat zien (<1 uur voor de meeste stammen), validatie van Gram-positief versus Gram-negatief spectrum, schimmelactiviteitsassays met C. albicans die antischimmelpotentie aantonen, membraanverstoringsassays met propidiumjodide-opname, SYTOX Green-kleuring of lactaatdehydrogenase-afgifte die bevestigen dat LL37 membraanpermeabilisatie veroorzaakt, biofilmverstoringsassays die aantonen dat LL37 voorgevormde P. aeruginosa- of S. aureus-biofilms vermindert, gemeten met kristalvioletkleuring of metabole activiteit (XTT-reductie), chemotactische activiteitsassays die aantonen dat LL37 neutrofielen of monocyten rekruteert met behulp van transwell-migratieassays met dosis-responskwantificering, cytokinemodulatieassays waarbij PBMC's of macrofagen worden behandeld met LL37 +/- LPS en IL-8-inductie en TNF-α-modulatie worden gemeten via ELISA, endotoxine-neutralisatieassays die aantonen dat LL37 LPS-geïnduceerde NF-κB-activering of cytokineproductie remt, circulair dichroïsme (CD) spectroscopie die de vorming van α-helixstructuur in membraanmimetische omgevingen (SDS-micellen, fosfolipidevesikels) bevestigt met kwantificering van helixgehalte, endotoxinetesten (<0,1 EU/mg via LAL-assay - cruciaal voor LL37 omdat het wordt gebruikt in LPS-gerelateerd onderzoek), en een uitgebreid analysecertificaat. Omgaan met kationische peptiden: de positieve lading van LL37 kan niet-specifieke binding aan negatief geladen oppervlakken (glas, sommige kunststoffen) veroorzaken; we raden aan om low-binding buizen te gebruiken en dragereiwitten (0,1% BSA) toe te voegen aan werksolutions voor verdunde concentraties om adsorptieverliezen aan het oppervlak te voorkomen.