LL37

Ia memiliki 37 asam amino, dan dua yang pertama adalah leusin (L dan L). Ia dipotong dari protein yang lebih besar bernama hCAP18.

Bentuk spiralnya memiliki sisi bermuatan dan sisi berminyak. Ia menempel pada membran bakteri, yang membawa muatan negatif lebih banyak daripada sel manusia, dan melubanginya.

Dalam studi laboratorium, ia memecah biofilm, lapisan pelindung yang dibangun bakteri, dan mencegah pembentukan biofilm baru.

Sepuluh vial tertutup berisi LL-37 beku-kering, masing-masing 5 mg, semuanya dari satu bets. Satu laporan bets mencakup kesepuluh vial tersebut.

Simpan vial yang masih tertutup pada suhu -20°C. Setelah dilarutkan, simpan pada suhu 2 hingga 8°C dan gunakan dalam waktu 14 hari.

LL37 dikirim sebagai bubuk beku-kering dalam vial tertutup, yang tetap stabil pada suhu kamar selama perjalanan. Setiap pesanan dikirim dalam kemasan polos dengan pelacakan, dan sebagian besar tiba dalam 7 hingga 14 hari. Simpan di freezer pada suhu -20°C setelah tiba. Sertifikat Analisis untuk bets yang kami kirimkan sekarang ada di halaman hasil laboratorium kami.

LL37 kami melampaui kemurnian >98% yang diverifikasi oleh HPLC fase terbalik yang menunjukkan waktu retensi karakteristik dari sekuens cathelicidin 37-asam amino. Setiap bets menjalani kontrol kualitas yang komprehensif: konfirmasi spektrometri massa berat molekul (~4493 Da) yang memvalidasi sekuens lengkap Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser, sekuensing peptida melalui fragmentasi MS/MS atau degradasi Edman yang memverifikasi setiap asam amino (perhatian khusus pada 6 residu Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu yang penting untuk struktur-aktivitas antimikroba), analisis komposisi asam amino yang mengkuantifikasi setiap residu yang mengonfirmasi kesetiaan sekuens dan muatan bersih +6, bioassay fungsional yang mengukur aktivitas antimikroba termasuk uji pembunuhan bakteri menggunakan bakteri Gram-positif (S. aureus ATCC 25923, termasuk strain MRSA) dan Gram-negatif (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) yang dikultur hingga fase log dan diobati dengan LL37 dosis meningkat selama 1-3 jam yang mengukur pengurangan unit pembentuk koloni (CFU) yang menunjukkan pembunuhan tergantung dosis dengan kuantifikasi konsentrasi hambat minimum (MIC) dan konsentrasi bakterisida minimum (MBC) (rentang MIC tipikal 0,5-8 μg/mL tergantung strain), kinetika waktu-mati yang menunjukkan aktivitas bakterisida cepat (<1 jam untuk sebagian besar strain), validasi spektrum Gram-positif vs Gram-negatif, uji aktivitas jamur menggunakan C. albicans yang menunjukkan potensi antijamur, uji gangguan membran menggunakan penyerapan propidium iodida, pewarnaan SYTOX Green, atau pelepasan laktat dehidrogenase yang mengonfirmasi LL37 menyebabkan permeabilisasi membran, uji gangguan biofilm yang menunjukkan LL37 mengurangi biofilm P. aeruginosa atau S. aureus yang sudah terbentuk yang diukur dengan pewarnaan kristal violet atau aktivitas metabolik (reduksi XTT), uji aktivitas kemotaktik yang menunjukkan LL37 merekrut neutrofil atau monosit menggunakan uji migrasi transwell dengan kuantifikasi respons dosis, uji modulasi sitokin yang mengobati PBMC atau makrofag dengan LL37 +/- LPS yang mengukur induksi IL-8 dan modulasi TNF-α melalui ELISA, uji netralisasi endotoksin yang menunjukkan LL37 menghambat aktivasi NF-κB atau produksi sitokin yang diinduksi LPS, spektroskopi circular dichroism (CD) yang mengonfirmasi pembentukan struktur α-heliks di lingkungan peniru membran (misel SDS, vesikel fosfolipid) dengan kuantifikasi kandungan heliks, uji endotoksin (<0,1 EU/mg melalui uji LAL - penting untuk LL37 karena digunakan dalam penelitian terkait LPS), dan Sertifikat Analisis yang komprehensif. Penanganan peptida kationik: muatan positif LL37 dapat menyebabkan pengikatan non-spesifik ke permukaan bermuatan negatif (kaca, beberapa plastik); kami merekomendasikan penggunaan tabung pengikat rendah dan menyertakan protein pembawa (BSA 0,1%) dalam larutan kerja untuk konsentrasi encer guna mencegah kehilangan adsorpsi permukaan.