LL37

Tiene 37 aminoácidos, y los dos primeros son leucinas (L y L). Se escinde de una proteína más grande llamada hCAP18.

Su forma helicoidal tiene un lado cargado y un lado oleoso. Se adhiere a las membranas bacterianas, que tienen una carga más negativa que las células humanas, y les perfora agujeros.

En estudios de laboratorio, descompone los biopelículas, las películas protectoras que construyen las bacterias, y evita la formación de nuevas.

Diez viales sellados de LL-37 liofilizado, 5 mg cada uno, todos del mismo lote. Un informe de lote cubre los diez.

Conserve los viales sellados a -20°C. Una vez reconstituido, manténgalo entre 2 y 8°C y úselo dentro de los 14 días.

LL-37 se envía como polvo liofilizado en viales sellados, que se mantiene estable a temperatura ambiente durante el trayecto. Todos los pedidos se envían en embalaje discreto con seguimiento, y la mayoría llega en un plazo de 7 a 14 días. Una vez recibido, guárdelo en el congelador a -20°C. El Certificado de Análisis del lote que estamos enviando actualmente está en nuestra página de resultados de laboratorio.

Nuestro LL-37 supera >98% de pureza verificada por HPLC en fase reversa que demuestra un tiempo de retención característico de la secuencia de catelicidina de 37 aminoácidos. Cada lote se somete a un control de calidad integral: confirmación por espectrometría de masas del peso molecular (~4493 Da) que valida la secuencia completa Leu-Leu-Gly-Asp-Phe-Phe-Arg-Lys-Ser-Lys-Glu-Lys-Ile-Gly-Lys-Glu-Phe-Lys-Arg-Ile-Val-Gln-Arg-Ile-Lys-Asp-Phe-Leu-Arg-Asn-Leu-Val-Pro-Arg-Thr-Glu-Ser, secuenciación peptídica mediante fragmentación MS/MS o degradación de Edman que verifica cada aminoácido (atención especial a los residuos 6 Lys, 6 Arg, 4 Phe, 3 Leu críticos para la actividad estructura-antimicrobiana), análisis de composición de aminoácidos que cuantifica cada residuo confirmando la fidelidad de la secuencia y la carga neta +6, bioensayos funcionales que miden la actividad antimicrobiana incluyendo ensayos de muerte bacteriana utilizando bacterias Gram-positivas (S. aureus ATCC 25923, incluyendo cepas MRSA) y Gram-negativas (E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa PAO1) cultivadas hasta fase logarítmica y tratadas con dosis crecientes de LL-37 durante 1-3 horas midiendo la reducción de unidades formadoras de colonias (UFC) demostrando muerte dependiente de la dosis con cuantificación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB) (rangos típicos de CMI 0.5-8 μg/mL según la cepa), cinética de muerte temporal que muestra actividad bactericida rápida (<1 hora para la mayoría de las cepas), validación del espectro Gram-positivo vs Gram-negativo, ensayos de actividad fúngica utilizando C. albicans que demuestran potencia antifúngica, ensayos de disrupción de membrana mediante captación de yoduro de propidio, tinción con SYTOX Green o liberación de lactato deshidrogenasa confirmando que LL-37 causa permeabilización de la membrana, ensayos de disrupción de biopelículas que muestran que LL-37 reduce biopelículas preformadas de P. aeruginosa o S. aureus medidas por tinción con cristal violeta o actividad metabólica (reducción de XTT), ensayos de actividad quimiotáctica que demuestran que LL-37 recluta neutrófilos o monocitos mediante ensayos de migración transwell con cuantificación de la respuesta a la dosis, ensayos de modulación de citoquinas tratando PBMCs o macrófagos con LL-37 +/- LPS midiendo la inducción de IL-8 y la modulación de TNF-α mediante ELISA, ensayos de neutralización de endotoxinas que muestran que LL-37 inhibe la activación de NF-κB o la producción de citoquinas inducida por LPS, espectroscopia de dicroísmo circular (CD) que confirma la formación de estructura α-helicoidal en entornos miméticos de membrana (micelas de SDS, vesículas de fosfolípidos) con cuantificación del contenido helicoidal, pruebas de endotoxinas (<0.1 UE/mg mediante ensayo LAL, crítico para LL-37 ya que se utiliza en investigación relacionada con LPS) y Certificado de Análisis integral. Manejo de péptidos catiónicos: la carga positiva de LL-37 puede causar unión inespecífica a superficies cargadas negativamente (vidrio, algunos plásticos); recomendamos usar tubos de baja unión e incluir proteínas portadoras (BSA al 0.1%) en las soluciones de trabajo para concentraciones diluidas a fin de prevenir pérdidas por adsorción en la superficie.