IGF-1 LR3

L significa Long (largo): 13 aminoácidos adicionales al inicio. R3 indica que una arginina ocupa la posición 3 en lugar del ácido glutámico. Juntos impiden que las proteínas de unión a IGF atrapen la molécula.

Ambos activan el receptor de IGF-1. El IGF-1 natural es retenido en gran medida por las proteínas de unión y actúa brevemente. El LR3 se une mucho menos a esas proteínas, por lo que permanece libre y activo durante mucho más tiempo.

La hormona del crecimiento actúa principalmente haciendo que el hígado produzca IGF-1, además de sus propios efectos. El IGF-1 LR3 omite ese paso y actúa directamente sobre el receptor de IGF-1.

Ambos evitan las proteínas de unión. El LR3 lo hace con una cadena más larga y dura más. El IGF-DES es IGF-1 al que le faltan los tres primeros aminoácidos y actúa durante un período más corto.

Diez viales sellados de IGF-1 LR3 liofilizado, todos del mismo lote, a 0,1 mg o 1 mg por vial. Un informe de lote cubre los diez.

El IGF-1 LR3 se envía como polvo liofilizado en viales sellados, que se mantiene estable a temperatura ambiente durante el trayecto. Todos los pedidos se envían en embalaje discreto con seguimiento, y la mayoría llega en un plazo de 7 a 14 días. Una vez recibido, consérvelo en el congelador a -20 °C. El Certificado de Análisis del lote que estamos enviando actualmente está en nuestra página de resultados de laboratorio.

Nuestro IGF-1 LR3 supera el 98 % de pureza verificada por HPLC, con un control de calidad exhaustivo para este factor de crecimiento modificado de 83 aminoácidos. Cada lote se somete a: HPLC en fase reversa que demuestra >98 % de pureza con un tiempo de retención característico del análogo LR3 extendido de 83 AA; confirmación del peso molecular por espectrometría de masas para la estructura modificada de IGF-1 (masa esperada ~9117 Da para la variante LR3 de 83 aminoácidos frente a ~7649 Da para el IGF-1 nativo de 70 AA); verificación de la secuencia peptídica que confirma la extensión N-terminal de 13 aminoácidos y la sustitución de ácido glutámico por arginina en la posición 3 mediante fragmentación MS/MS o degradación de Edman; validación de la modificación que asegura la correcta incorporación de Arg3 y la precisión de la extensión N-terminal; bioensayos de unión al receptor de IGF-1 que miden la afinidad del IGF-1 LR3 por IGF-1R mediante ensayos de competición de receptores o estudios de unión basados en células (Kd típicamente en el rango nanomolar bajo, comparable al IGF-1 nativo a pesar de las modificaciones estructurales); ensayos de unión a IGFBP que demuestran una afinidad reducida, comparando la unión de IGF-1 LR3 frente a IGF-1 nativo a IGFBP-3 y otras IGFBP mediante resonancia de plasmón superficial o ensayos de competición, confirmando una reducción de 100 a 1000 veces y validando las modificaciones Arg3/extensión; bioensayos de proliferación celular que utilizan mioblastos, fibroblastos u otras células sensibles a IGF-1, midiendo la proliferación dependiente de la dosis (ensayos MTT/BrdU) y demostrando la activación funcional de IGF-1R; ensayos de fosforilación de AKT y MAPK, tratando células con IGF-1 LR3 y midiendo pAKT (Ser473) y pERK1/2 mediante Western blot, lo que confirma la activación de las vías PI3K-AKT-mTOR y RAS-MAPK; ensayos de síntesis de proteínas que utilizan incorporación de [3H]-leucina o incorporación de puromicina, midiendo la traducción estimulada por IGF-1 LR3 y validando la señalización anabólica; pruebas de endotoxinas (<0,1 UE/mg); y un Certificado de Análisis exhaustivo. La pureza >98 % garantiza una activación reproducible de IGF-1R, respuestas proliferativas/anabólicas consistentes y una investigación fiable del crecimiento muscular. El control de calidad valida la identidad química (secuencia de 83 AA con Arg3 y extensión N-terminal), la unión reducida a IGFBP (modificación funcional clave) y la actividad biológica (señalización de IGF-1R, proliferación celular, síntesis de proteínas), esencial para la investigación de análogos de IGF-1.

Más allá de la pureza química (HPLC >98 %, espectrometría de masas que confirma la estructura de 83 AA con Arg3 y extensión N-terminal), realizamos ensayos integrales de unión a receptores y a IGFBP: (1) Ensayos de unión al receptor de IGF-1: utilizando células que expresan IGF-1R (mioblastos, fibroblastos o líneas celulares transfectadas con IGF-1R), medimos la capacidad del IGF-1 LR3 para competir con IGF-1 radiomarcado por la unión al receptor (ensayos de unión competitiva) o para unirse directamente al IGF-1R (unión por saturación que determina la afinidad Kd, típicamente 1-5 nM), lo que demuestra un reconocimiento de alta afinidad por el receptor a pesar de las modificaciones estructurales. (2) Ensayos de unión a IGFBP: el control de calidad crítico que valida la modificación LR3: utilizando IGFBP-3 purificada (principal transportador de IGF-1) u otras IGFBP, medimos la unión de IGF-1 LR3 frente a IGF-1 nativo mediante resonancia de plasmón superficial, ensayos de competición basados en ELISA o Western ligand blot, lo que demuestra una afinidad reducida de 100 a 1000 veces, confirmando que la sustitución de Arg3 y la extensión N-terminal interrumpieron con éxito las interacciones con IGFBP. (3) Autofosforilación del receptor: Western blot que mide la fosforilación de tirosina del IGF-1R tras la unión de IGF-1 LR3 (pIGF-1R Tyr1135/1136), lo que demuestra la activación del receptor. (4) Ensayos de fosforilación de AKT: tratamiento de células con IGF-1 LR3 y medición de pAKT Ser473 y Thr308 mediante Western blot o citometría de flujo de fosfoepítopos, lo que confirma la activación de la vía PI3K-AKT (señalización anabólica/de supervivencia). (5) Activación de MAPK: medición de pERK1/2 (Thr202/Tyr204) y pMEK1/2 que demuestra la estimulación de la vía RAS-MAPK (proliferación). (6) Ensayos de la vía mTOR: Western blot para fosfo-p70S6K (Thr389), fosfo-4E-BP1 (Thr37/46) y proteína ribosomal S6 fosforilada que validan la activación de mTORC1, crítica para la síntesis de proteínas. (7) Bioensayos de proliferación celular: MTT, incorporación de BrdU o recuento celular en mioblastos o fibroblastos que muestran proliferación dependiente de la dosis con valores de EC50 que demuestran una potente actividad mitogénica. (8) Ensayos de síntesis de proteínas: incorporación de [3H]-leucina o [35S]-metionina, o incorporación de puromicina (método SUnSET) que cuantifican la traducción estimulada por IGF-1 LR3. (9) Potencia comparativa: prueba lado a lado de IGF-1 LR3 frente a IGF-1 nativo que muestra los efectos anabólicos mejorados de LR3 debido a la biodisponibilidad sostenida. El CoA incluye datos de unión al IGF-1R (afinidad Kd), comparación de unión a IGFBP (que demuestra la reducción frente al IGF-1 nativo), respuestas de fosforilación de AKT/MAPK dependientes de la dosis y bioensayos de proliferación celular/síntesis de proteínas, lo que garantiza IGF-1 LR3 de grado farmacéutico con activación del receptor validada y reducción de la unión a IGFBP.