MGF

Ambos provienen del gen IGF-1. El IGF-1 maduro circula por el cuerpo y ayuda a que las células maduren. El MGF es la parte final de una variante de empalme muscular, producida localmente tras una carga o lesión, y mantiene la división de las células precursoras musculares.

El MGF se descompone en cuestión de minutos. El PEG MGF lleva una gran cadena de polietilenglicol que lo protege, por lo que dura mucho más. El MGF es adecuado para señales locales breves; el PEG MGF es adecuado para estudios más prolongados.

Porque el músculo lo produce en respuesta a una carga mecánica o daño. El nombre proviene del grupo de Geoffrey Goldspink, que lo describió.

Diez viales sellados de MGF liofilizado, de 2 mg cada uno, todos del mismo lote. Un informe de lote cubre los diez.

Mantenga los viales sellados a -20°C. Una vez reconstituido, manténgalo entre 2 y 8°C y utilícelo dentro de los 14 días. Es de vida corta en solución, por lo que solo debe reconstituir lo que necesite un estudio.

El MGF se envía como polvo liofilizado en viales sellados, que se mantiene estable a temperatura ambiente durante el trayecto. Cada pedido se envía en embalaje discreto con seguimiento, y la mayoría llega en un plazo de 7 a 14 días. Una vez recibido, guárdelo en el congelador a -20°C. El Certificado de Análisis del lote que estamos enviando actualmente está en nuestra página de resultados de laboratorio.

Nuestro MGF supera >98% de pureza verificada por HPLC con un control de calidad exhaustivo para el péptido de la variante de empalme IGF-1Ec. Cada lote se somete a: confirmación del peso molecular por espectrometría de masas para la secuencia completa de MGF, incluyendo la extensión C-terminal única del dominio E (el peso molecular varía según la construcción específica de MGF, típicamente el fragmento de longitud completa o el fragmento C-terminal bioactivo), verificación de la secuencia peptídica que confirma la secuencia única del dominio E derivada de la inserción de 52 pares de bases que distingue al MGF del IGF-1Ea sistémico, HPLC que demuestra un pico principal único con el tiempo de retención adecuado, bioensayos de proliferación de células satélite que miden la capacidad del MGF para estimular la activación y proliferación de células satélite quiescentes en cultivos primarios de células satélite musculares (típicamente usando mioblastos C2C12 o células satélite derivadas de primarios), demostrando el aumento de proliferación en comparación con los controles de vehículo, bioactividad comparativa frente a IGF-1 que muestra perfiles de potencia distintos en ensayos de células satélite frente a miotubos diferenciados, detección de endotoxinas (<0.1 EU/mg) y un Certificado de Análisis completo. La pureza >98% garantiza una activación reproducible de las células satélite, efectos consistentes de proliferación de mioblastos e investigación confiable de regeneración muscular sin interferencia de productos de degradación o variantes de empalme incorrectas. Todas las pruebas validan tanto la identidad química (secuencia correcta del dominio E única del MGF) como la actividad biológica (estimulación de células satélite) esencial para una investigación confiable de reparación y regeneración muscular que distingue al MGF de otras isoformas de IGF-1.

Más allá de la pureza química (HPLC, espectrometría de masas que confirma la variante de empalme correcta IGF-1Ec con la secuencia única del dominio E), realizamos bioensayos funcionales exhaustivos: (1) Ensayos de proliferación de células satélite: tratar células satélite musculares primarias quiescentes o mioblastos C2C12 con MGF y medir la proliferación mediante incorporación de BrdU, marcaje con EdU o recuento celular durante 24-72 h, demostrando un aumento de la proliferación dependiente de la dosis (generalmente 2-4 veces frente a los controles con vehículo a concentraciones óptimas), (2) Ensayos de activación de células satélite: medir la transición del estado quiescente (Pax7+/MyoD-) al estado activado (Pax7+/MyoD+) mediante inmunofluorescencia o citometría de flujo que muestra la activación inducida por MGF, (3) Cronología de diferenciación de mioblastos: tratar cultivos durante la transición de proliferación a diferenciación mostrando que MGF mantiene el estado proliferativo y retrasa la diferenciación en comparación con IGF-1 sistémico que promueve la diferenciación, (4) Potencia comparativa frente a IGF-1: pruebas comparativas que revelan la actividad preferencial de MGF en la proliferación de células satélite frente a los efectos promotores de la diferenciación del IGF-1 sistémico, (5) Caracterización de la relación dosis-respuesta: establecer valores de EC50 para la proliferación en tipos celulares relevantes, (6) Activación de vías de señalización: transferencias Western que demuestran la fosforilación inducida por MGF de las vías PI3K-Akt, MAPK-ERK (similar a IGF-1) pero potencialmente con cinéticas o magnitud distintas que reflejan el dominio E único, y (7) Confirmación de la identidad de la variante de empalme: RT-PCR o secuenciación que confirma que MGF es la isoforma IGF-1Ec, no IGF-1Ea. El CoA incluye datos de proliferación de células satélite (aumento en veces frente al control, valores de EC50) y verificación de la variante de empalme, lo que garantiza que recibe MGF auténtico, no IGF-1 sistémico. Estos ensayos validan la característica definitoria de MGF: potente activación de células satélite y proliferación de mioblastos, distinta de los efectos promotores de la diferenciación del IGF-1 sistémico.