IGF-1 LR3

L sta per Long (lungo): 13 amminoacidi aggiuntivi all'inizio. R3 significa che in posizione 3 c'è un'arginina al posto dell'acido glutammico. Insieme impediscono alle proteine leganti l'IGF di intrappolarlo.

Entrambi attivano il recettore dell'IGF-1. L'IGF-1 naturale è per lo più trattenuto dalle proteine leganti e agisce brevemente. LR3 si lega molto meno a quelle proteine, quindi rimane libero e attivo molto più a lungo.

L'ormone della crescita agisce principalmente stimolando il fegato a produrre IGF-1, oltre ad avere effetti propri. L'IGF-1 LR3 salta questo passaggio e agisce direttamente sul recettore dell'IGF-1.

Entrambi sfuggono alle proteine leganti. LR3 lo fa con una catena più lunga e dura di più. L'IGF-DES è IGF-1 privo dei primi tre amminoacidi e agisce per un periodo più breve.

Dieci flaconcini sigillati di IGF-1 LR3 liofilizzato, tutti dello stesso lotto, da 0,1 mg o 1 mg per flaconcino. Un unico report di lotto copre tutti e dieci.

L'IGF-1 LR3 viene spedito come polvere liofilizzata in flaconcini sigillati, che rimane stabile a temperatura ambiente durante il trasporto. Ogni ordine viene inviato in imballaggio anonimo con tracciabilità e la maggior parte arriva in 7-14 giorni. Una volta ricevuto, conservalo in congelatore a -20°C. Il Certificato di Analisi per il lotto che stiamo spedendo è sulla nostra pagina dei risultati di laboratorio.

Il nostro IGF-1 LR3 supera >98% di purezza verificata tramite HPLC con un controllo qualità completo per questo fattore di crescita modificato di 83 amminoacidi. Ogni lotto viene sottoposto a: HPLC in fase inversa che dimostra >98% di purezza con tempo di ritenzione caratteristico dell'analogo LR3 esteso di 83 AA, conferma del peso molecolare tramite spettrometria di massa per la struttura modificata dell'IGF-1 (massa prevista ~9117 Da per la variante LR3 di 83 amminoacidi rispetto a ~7649 Da per l'IGF-1 nativo di 70 AA), verifica della sequenza peptidica che conferma l'estensione N-terminale di 13 amminoacidi più la sostituzione acido glutammico→arginina in posizione 3 tramite frammentazione MS/MS o degradazione di Edman, convalida della modifica che garantisce la corretta incorporazione di Arg3 e l'accuratezza dell'estensione N-terminale, saggi biologici di legame al recettore dell'IGF-1 che misurano l'affinità dell'IGF-1 LR3 per IGF-1R utilizzando saggi di competizione recettoriale o studi di legame basati su cellule (Kd tipicamente nanomolare bassa, paragonabile all'IGF-1 nativo nonostante le modifiche strutturali), saggi di legame IGFBP che dimostrano un'affinità ridotta - confrontando il legame di IGF-1 LR3 vs IGF-1 nativo a IGFBP-3 e altre IGFBP tramite risonanza plasmonica di superficie o saggi di competizione che confermano una riduzione di 100-1000 volte convalidando le modifiche Arg3/estensione, saggi biologici di proliferazione cellulare utilizzando mioblasti, fibroblasti o altre cellule responsive all'IGF-1 che misurano la proliferazione dose-dipendente (saggi MTT/BrdU) dimostrando l'attivazione funzionale di IGF-1R, saggi di fosforilazione di AKT e MAPK - trattamento delle cellule con IGF-1 LR3 e misurazione di pAKT (Ser473) e pERK1/2 tramite Western blot che conferma l'attivazione delle vie PI3K-AKT-mTOR e RAS-MAPK, saggi di sintesi proteica utilizzando incorporazione di [3H]-leucina o puromicina che misurano la traduzione stimolata da IGF-1 LR3 convalidando la segnalazione anabolica, test dell'endotossina (<0,1 EU/mg) e Certificato di Analisi completo. La purezza >98% garantisce un'attivazione riproducibile di IGF-1R, risposte proliferative/anaboliche consistenti e una ricerca affidabile sulla crescita muscolare. Il controllo qualità convalida l'identità chimica (sequenza di 83 AA con Arg3 ed estensione N-terminale), il legame ridotto alle IGFBP (modifica funzionale chiave) e l'attività biologica (segnalazione IGF-1R, proliferazione cellulare, sintesi proteica) essenziale per la ricerca sugli analoghi dell'IGF-1.

Oltre alla purezza chimica (HPLC >98%, spettrometria di massa che conferma la struttura di 83 AA con Arg3 ed estensione N-terminale), eseguiamo saggi completi di legame al recettore e a IGFBP: (1) Saggi di legame al recettore IGF-1: utilizzando cellule che esprimono IGF-1R (mioblasti, fibroblasti o linee cellulari trasfettate con IGF-1R), misuriamo la capacità di IGF-1 LR3 di competere con IGF-1 marcato radioattivamente per il legame al recettore (saggi di competizione) o di legarsi direttamente a IGF-1R (saturazione che determina l'affinità Kd tipicamente 1-5 nM), dimostrando un riconoscimento ad alta affinità nonostante le modifiche strutturali. (2) Saggi di legame IGFBP: il controllo qualità critico che valida la modifica LR3: utilizzando IGFBP-3 purificato (principale trasportatore di IGF-1) o altri IGFBP, misuriamo il legame di IGF-1 LR3 rispetto a IGF-1 nativo tramite risonanza plasmonica di superficie, saggi di competizione ELISA o Western ligand blot, dimostrando un'affinità ridotta di 100-1000 volte che conferma che la sostituzione di Arg3 e l'estensione N-terminale hanno interrotto con successo le interazioni con IGFBP. (3) Autofosforilazione del recettore: Western blot che misura la fosforilazione della tirosina di IGF-1R dopo il legame di IGF-1 LR3 (pIGF-1R Tyr1135/1136), dimostrando l'attivazione del recettore. (4) Saggi di fosforilazione di AKT: trattamento delle cellule con IGF-1 LR3 e misurazione di pAKT Ser473 e Thr308 tramite Western blot o citometria a flusso fosfo-specifica, confermando l'attivazione della via PI3K-AKT (segnale anabolico/sopravvivenza). (5) Attivazione di MAPK: misurazione di pERK1/2 (Thr202/Tyr204) e pMEK1/2 che dimostra la stimolazione della via RAS-MAPK (proliferazione). (6) Saggi della via mTOR: Western blot per p-p70S6K (Thr389), p-4E-BP1 (Thr37/46) e proteina ribosomiale p-S6 che validano l'attivazione di mTORC1 critica per la sintesi proteica. (7) Saggi di proliferazione cellulare: MTT, incorporazione di BrdU o conta cellulare in mioblasti o fibroblasti che mostrano una proliferazione dose-dipendente con valori di EC50 che dimostrano una potente attività mitogena. (8) Saggi di sintesi proteica: incorporazione di [3H]-leucina o [35S]-metionina, o incorporazione di puromicina (metodo SUnSET) che quantificano la traduzione stimolata da IGF-1 LR3. (9) Potenza comparativa: test affiancati di IGF-1 LR3 vs IGF-1 nativo che mostrano gli effetti anabolici potenziati di LR3 dovuti alla biodisponibilità prolungata. Il CoA include dati di legame IGF-1R (affinità Kd), confronto del legame IGFBP (che dimostra la riduzione rispetto a IGF-1 nativo), risposte dose-dipendenti della fosforilazione di AKT/MAPK e saggi di proliferazione cellulare/sintesi proteica, garantendo IGF-1 LR3 di grado farmaceutico con attivazione recettoriale validata e ridotto legame IGFBP.