TB-500 (Тимозин Бета-4)

TB-500 від Lyze – це повна послідовність тимозину бета-4: 43 амінокислоти, N-кінцево ацетильований, приблизно 4963 г/моль, як зазначено в сертифікаті партії. Деякі продавці продають фрагмент із 7 амінокислот під тією ж назвою, що є іншою молекулою.

Він зв'язує окремі одиниці актину та контролює, коли вони з'єднуються у філаменти. Таким чином клітини змінюють форму та рухаються, тому його вивчають скрізь, де клітинам потрібно проникати в пошкоджену тканину.

TB-500 контролює актин і рух клітин. BPC-157 діє переважно через ріст кровоносних судин і виживання клітин. Вони впливають на різні етапи відновлення, тому їх часто вивчають разом, як два набори або як один мікс.

Десять герметичних флаконів ліофілізованого TB-500 з однієї партії, по 2 мг, 5 мг або 10 мг у флаконі. Один звіт про партію охоплює всі десять. Бактеріостатична вода продається окремо.

Зберігайте герметичні флакони при -20°C для тривалого зберігання або в холодильнику для короткострокового використання. Після розведення зберігайте при 2–8°C і використовуйте протягом 14 днів. Обережно обертайте для розчинення; не струшуйте.

TB-500 (Thymosin Beta 4) доставляється у вигляді ліофілізованого порошку в герметичних флаконах, який залишається стабільним при кімнатній температурі під час транспортування. Кожне замовлення відправляється в непомітній упаковці з відстеженням, і більшість прибуває протягом 7–14 днів. Після отримання зберігайте в морозильнику при -20°C. Сертифікат аналізу для партії, яку ми відправляємо зараз, знаходиться на нашій сторінці лабораторних результатів.

Наш TB500 перевищує >98% чистоти, підтвердженої аналізом HPLC із комплексним контролем якості для пептиду з 43 амінокислот. Кожна партія проходить: підтвердження молекулярної маси мас-спектрометрією для повної послідовності Thymosin Beta 4 (молекулярна маса ~4963 Da), верифікацію послідовності пептиду, що підтверджує всі 43 амінокислоти, включаючи критичний актин-зв'язуючий домен (залишки 17–28), HPLC, що демонструє єдиний основний пік із належним часом утримування та мінімальними продуктами деградації, аналізи зв'язування актину, що вимірюють здатність TB500 секвеструвати G-актин і запобігати полімеризації (кількісно визначені за допомогою аналізів полімеризації пірен-актину, що показують дозозалежне інгібування), біоаналізи міграції клітин із використанням аналізів подряпин/загоєння ран у моношарах фібробластів або ендотеліальних клітин, що демонструють підвищену швидкість міграції, аналізи проліферації, що показують збільшення проліферації клітин у відповідних типах клітин, скринінг ендотоксинів (<0.1 EU/мг за допомогою LAL-аналізу) та комплексний сертифікат аналізу. Чистота >98% забезпечує відтворювану актин-зв'язуючу активність, стабільні ефекти міграції клітин і надійні ангіогенні властивості без перешкод від продуктів деградації або неправильних послідовностей. Усі тести підтверджують як хімічну ідентичність (правильна послідовність із 43 АК, належна молекулярна маса), так і біологічну активність (секвестрація актину, стимуляція міграції клітин), необхідні для надійних досліджень загоєння ран і регенерації.

Окрім хімічної чистоти (HPLC, мас-спектрометрія для підтвердження правильної послідовності з 43 амінокислот), ми проводимо комплексні функціональні біоаналізи: (1) Аналізи полімеризації пірен-актину - вимірювання здатності TB500 запобігати полімеризації G-актину шляхом моніторингу зменшення флуоресценції (флуоресценція міченого піреном актину зростає при полімеризації у F-актин; секвестрація G-актину TB500 запобігає цьому зростанню), що демонструє дозозалежне інгібування зі значеннями IC50, що підтверджують спорідненість зв'язування актину, (2) Скретч-аналізи загоєння ран - створення стандартизованих подряпин у конфлюентних моношарах фібробластів (NIH-3T3) або ендотеліальних клітин (HUVEC), обробка TB500 та вимірювання закриття проміжку протягом 24-48 годин за допомогою мікроскопії, що показує прискорену міграцію в зону рани порівняно з контролем, (3) Аналізи міграції Transwell - вимірювання хемотаксичної міграції, індукованої TB500, через пористі мембрани до градієнтів хемоаттрактантів, (4) Аналізи проліферації клітин - MTT або BrdU для демонстрації підвищеної проліферації в клітинах, оброблених TB500, (5) Візуалізація актинового цитоскелета - фарбування фаллоїдином, що виявляє вплив TB500 на утворення ламмеліподій, організацію стрес-фібрил та клітинну морфологію, (6) Аналізи утворення трубок - ендотеліальні клітини на Matrigel, що показують утворення ангіогенних трубок/мереж, індуковане TB500, що вказує на ангіогенну біоактивність, та (7) Активація сигнальних шляхів - Вестерн-блотинг, що демонструє фосфорилювання Akt, ERK1/2 та FAK, індуковане TB500, підтверджуючи інтегрин-опосередковану сигналізацію. CoA включає дані зв'язування актину (значення IC50 пірен-актину) та біоактивність міграції клітин (кратне збільшення закриття рани порівняно з контролем), що забезпечує фізіологічно релевантну активність відновлення тканин.