HCG

ไม่ใช่ แต่ทั้งสองใช้รีเซพเตอร์ร่วมกัน hCG และ LH มีซับยูนิตอัลฟาเหมือนกันและซับยูนิตเบตาที่คล้ายกัน hCG มีสายน้ำตาลมากกว่า จึงคงอยู่ในร่างกายได้นานกว่ามาก

Gonadorelin กระตุ้นต่อมใต้สมองให้ปล่อย LH และ FSH ส่วน hCG ข้ามต่อมใต้สมองและออกฤทธิ์โดยตรงต่อรีเซพเตอร์ LH ในอัณฑะหรือรังไข่

hCG ออกฤทธิ์เหมือน LH ส่วน hMG มีทั้งฤทธิ์ของ FSH และ LH มักถูกศึกษาใช้ร่วมกันในแบบจำลองการสืบพันธุ์

หน่วยสากล (International Units) ซึ่งเป็นหน่วยวัดฤทธิ์ทางชีวภาพ hCG เป็นไกลโคโปรตีนขนาดใหญ่ ดังนั้นจึงนิยมระบุความแรงด้วยฤทธิ์ทางชีวภาพมากกว่าน้ำหนัก

ขวดปิดผนึก 10 ขวดที่บรรจุ hCG แบบแห้งเยือกแข็ง (freeze-dried) จากล็อตเดียวกัน ขวดละ 5,000 IU หรือ 10,000 IU รายงานผลการวิเคราะห์หนึ่งฉบับครอบคลุมทั้ง 10 ขวด

hCG จัดส่งเป็นผงแห้งเยือกแข็งในขวดปิดผนึก ซึ่งคงตัวที่อุณหภูมิห้องระหว่างการขนส่ง ทุกคำสั่งซื้อจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ธรรมดาพร้อมหมายเลขติดตาม และส่วนใหญ่ใช้เวลา 7 ถึง 14 วัน เมื่อได้รับแล้วให้เก็บในช่องแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20°C ใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) สำหรับล็อตที่กำลังจัดส่งอยู่ในหน้า lab-results ของเรา

HCG ของเรามีความบริสุทธิ์ >98% ซึ่งยืนยันโดย HPLC พร้อมการควบคุมคุณภาพระดับเภสัชกรรมอย่างครอบคลุมสำหรับฮอร์โมนไกลโคโปรตีนที่ซับซ้อนนี้ แต่ละล็อตผ่านการตรวจสอบดังนี้ reverse-phase HPLC แสดงความบริสุทธิ์ >98% โดยมี retention time ที่เหมาะสมสำหรับ HCG heterodimer ที่สมบูรณ์ (ซับยูนิต α+β), size-exclusion chromatography (SEC) ยืนยันน้ำหนักโมเลกุลที่ถูกต้อง (~37-39 kDa ขึ้นอยู่กับระดับ glycosylation ซึ่งใหญ่กว่าเปปไทด์ฮอร์โมนอย่างมากเนื่องจากหมู่คาร์โบไฮเดรต), mass spectrometry ยืนยันน้ำหนักโมเลกุลและระบุซับยูนิต (ซับยูนิต α ~14.5 kDa, ซับยูนิต β ~22-24 kDa พร้อม N- และ O-linked glycosylation อย่างกว้างขวาง), การวิเคราะห์ glycosylation ยืนยันการเกาะของคาร์โบไฮเดรตที่ถูกต้อง (สำคัญต่อฤทธิ์ทางชีวภาพและครึ่งชีวิต HCGβ มีตำแหน่ง N-glycosylation 4 ตำแหน่งและ O-glycosylation 4 ตำแหน่ง), การยืนยัน intact heterodimer ตรวจสอบการเชื่อมต่อแบบ non-covalent ระหว่าง α-β (รูปแบบที่ออกฤทธิ์ ซับยูนิตที่แยกกันไม่ออกฤทธิ์), LHCGR binding bioassays วัดความสัมพันธ์ของ HCG ต่อรีเซพเตอร์ LH/CG โดยใช้ receptor competition assays หรือ cell-based binding studies (Kd โดยทั่วไปอยู่ในระดับนาโนโมลาร์ต่ำ), steroidogenesis bioassays ซึ่งเป็นมาตรฐานทองคำที่แสดงฤทธิ์เชิงหน้าที่โดยใช้ Leydig cells (การผลิตเทสโทสเตอโรน) หรือ luteal cells (การผลิตโปรเจสเตอโรน) ที่บำบัดด้วย HCG และวัดปริมาณสเตียรอยด์ที่ผลิตด้วย ELISA/LC-MS, cAMP accumulation assays ยืนยันการกระตุ้น LHCGR ที่จับคู่กับ Gs เมื่อ HCG จับ, การวัดปริมาณความแรง (potency quantification) เปรียบเทียบฤทธิ์ทางชีวภาพกับมาตรฐานอ้างอิง HCG สากล (วัดเป็นหน่วยสากล IU), การทดสอบเอนโดทอกซิน (<0.1 EU/mg) และใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) ที่ครอบคลุม ความบริสุทธิ์ >98% ช่วยให้มั่นใจได้ถึงการกระตุ้น LHCGR ที่ทำซ้ำได้ การตอบสนองต่อการสร้างสเตียรอยด์ที่สม่ำเสมอ และผลการวิจัยที่เชื่อถือได้ การควบคุมคุณภาพตรวจสอบทั้งเอกลักษณ์ทางเคมี (ไกลโคโปรตีนสมบูรณ์ที่มีการประกอบซับยูนิตและ glycosylation ที่ถูกต้อง) และหน้าที่ทางชีวภาพ (การจับรีเซพเตอร์ การกระตุ้นการสร้างสเตียรอยด์) ซึ่งจำเป็นต่อการวิจัย gonadotropin อย่างยิ่ง

นอกเหนือจากความบริสุทธิ์ทางเคมี (HPLC >98%, mass spec ยืนยัน α-β heterodimer ที่มี glycosylation ที่ถูกต้อง) เราทำการทดสอบ LHCGR binding และ functional steroidogenesis bioassays อย่างครอบคลุม: (1) การทดสอบ LHCGR binding - ใช้เซลล์ Leydig (เพศชาย), เซลล์ theca หรือ luteal (เพศหญิง) หรือเซลล์สายพันธุ์ที่ถ่าย LHCGR วัดความสามารถของ HCG ในการแข่งขันกับ HCG หรือ LH ที่ติดฉลากกัมมันตภาพรังสีสำหรับการจับกับรีเซพเตอร์ (การทดสอบการแข่งขัน) หรือจับกับ LHCGR โดยตรง (การจับแบบอิ่มตัวกำหนดความสัมพันธ์ Kd โดยทั่วไป 0.1-1 nM) ยืนยันการรับรู้รีเซพเตอร์ความสัมพันธ์สูงเทียบเท่ากับ LH ธรรมชาติ (2) การทดสอบ cAMP accumulation - รักษาเซลล์ที่แสดง LHCGR ด้วย HCG และวัดปริมาณ cAMP ในเซลล์ (ผ่าน ELISA หรือการทดสอบ fluorescence) แสดงการกระตุ้น Gs-coupled receptor ที่มีความสัมพันธ์แบบ dose-response และค่า EC50 ที่ยืนยันการส่งสัญญาณ (3) การทดสอบ steroidogenesis bioassay - มาตรฐานทองคำโดยใช้เซลล์ Leydig หลัก (วัดการผลิต testosterone ผ่าน ELISA หรือ LC-MS/MS) หรือเซลล์ luteal (วัด progesterone) ที่รักษาด้วยความเข้มข้น HCG ต่างๆ สร้างเส้นโค้ง dose-response แสดงความสามารถของ HCG ในการกระตุ้นการสังเคราะห์สเตียรอยด์ผ่านการเพิ่มขึ้นของโปรตีน StAR และการกระตุ้นเอนไซม์ steroidogenic วัดความแรงทางชีวภาพเป็นหน่วยสากล (IU) เทียบกับมาตรฐานอ้างอิง WHO (4) การแสดงออกของโปรตีน StAR - Western blot หรือ qPCR วัดการเพิ่มขึ้นของ StAR ที่เหนี่ยวนำโดย HCG (ขั้นตอนจำกัดอัตราใน steroidogenesis ที่อำนวยความสะดวกในการขนส่งคอเลสเตอรอลเข้าสู่ไมโตคอนเดรีย) ยืนยันการส่งสัญญาณต้นน้ำ (5) การกระตุ้นเอนไซม์ steroidogenic - วัดกิจกรรมเอนไซม์ P450scc, 3β-HSD, 17β-HSD แสดงการกระตุ้น cascade steroidogenic อย่างสมบูรณ์ (6) การตอบสนองชั่วคราว - วัดจลนศาสตร์การผลิต testosterone/progesterone ตลอด 24-72 ชั่วโมง แสดง steroidogenesis ต่อเนื่องจากครึ่งชีวิตที่ยาวนานของ HCG เทียบกับการตอบสนองเฉียบพลันกับ agonists ที่มีอายุสั้น (7) ความแรงเปรียบเทียบ - ทดสอบ HCG ควบคู่กับ LH รีคอมบิแนนท์หรือมาตรฐาน HCG อ้างอิง แสดงการกระตุ้น LHCGR ที่เทียบเท่ายืนยัน bioactivity เต็มรูปแบบ (8) การลดลงของรีเซพเตอร์ - การรักษา HCG เรื้อรังแสดงการลดลงของ LHCGR และการดื้อต่อ steroidogenic ยืนยันผลของการกระตุ้นเรื้อรัง CoA รวมถึงข้อมูล LHCGR binding (ความสัมพันธ์ Kd), การกระตุ้น cAMP (EC50), เส้นโค้ง dose-response ของ steroidogenesis bioassay พร้อมการวัดความแรง IU และกิจกรรมเปรียบเทียบกับมาตรฐานสากล - รับประกัน HCG ระดับเภสัชกรรมที่มี gonadotropin bioactivity ที่ตรวจสอบแล้ว