MGF

Оба происходят из гена IGF-1. Зрелый IGF-1 циркулирует по организму и помогает клеткам созревать. MGF представляет собой концевую часть мышечной сплайс-формы, которая вырабатывается локально после нагрузки или травмы и поддерживает деление клеток-предшественников мышц.

MGF разрушается в течение нескольких минут. PEG MGF несет большую цепь полиэтиленгликоля, которая его защищает, поэтому он действует гораздо дольше. MGF подходит для коротких локальных сигналов; PEG MGF подходит для более длительных исследований.

Потому что мышцы вырабатывают его в ответ на механическую нагрузку или повреждение. Название происходит от группы Джеффри Голдспинка, которая его описала.

Десять запечатанных флаконов лиофилизированного MGF по 2 мг каждый, все из одной партии. Один отчет о партии распространяется на все десять.

Храните запечатанные флаконы при -20°C. После разведения храните при 2–8°C и используйте в течение 14 дней. В растворе он недолговечен, поэтому разводите только то количество, которое необходимо для исследования.

MGF поставляется в виде лиофилизированного порошка в запечатанных флаконах, который остается стабильным при комнатной температуре во время транспортировки. Каждый заказ отправляется в простой упаковке с отслеживанием, и большинство заказов прибывают в течение 7–14 дней. После получения поместите его в морозильник при -20°C. Сертификат анализа на текущую отгружаемую партию находится на нашей странице с результатами лабораторных исследований.

Наш MGF превышает чистоту >98%, подтвержденную ВЭЖХ, с комплексным контролем качества для сплайс-варианта пептида IGF-1Ec. Каждая партия проходит: масс-спектрометрическое подтверждение молекулярной массы для полной последовательности MGF, включая уникальное C-концевое удлинение E-домена (молекулярная масса варьируется в зависимости от конкретной конструкции MGF – обычно полноразмерный или биоактивный C-концевой фрагмент), подтверждение последовательности пептида, подтверждающее уникальную последовательность E-домена, полученную из вставки из 52 пар оснований, отличающую MGF от системного IGF-1Ea, ВЭЖХ, демонстрирующую единый основной пик с правильным временем удерживания, биоанализы пролиферации клеток-сателлитов, измеряющие способность MGF стимулировать активацию и пролиферацию покоящихся клеток-сателлитов в первичных культурах мышечных клеток-сателлитов (обычно с использованием миобластов C2C12 или первично полученных клеток-сателлитов), демонстрирующие кратное увеличение пролиферации по сравнению с контролями-носителями, сравнительную биоактивность по сравнению с IGF-1, показывающую различные профили активности в анализах клеток-сателлитов и дифференцированных миотрубок, скрининг эндотоксинов (<0.1 EU/мг) и комплексный Сертификат анализа. Чистота >98% обеспечивает воспроизводимую активацию клеток-сателлитов, стабильные эффекты пролиферации миобластов и надежные исследования регенерации мышц без помех от продуктов деградации или неправильных сплайс-вариантов. Все тесты подтверждают как химическую идентичность (правильная последовательность E-домена, уникальная для MGF), так и биологическую активность (стимуляция клеток-сателлитов), необходимые для надежных исследований восстановления и регенерации мышц, отличающих MGF от других изоформ IGF-1.

Помимо химической чистоты (ВЭЖХ, масс-спектрометрия, подтверждающая правильный вариант сплайсинга IGF-1Ec с уникальной последовательностью E-домена), мы проводим комплексные функциональные биоанализы: (1) Анализы пролиферации сателлитных клеток: обработка покоящихся первичных мышечных сателлитных клеток или миобластов C2C12 с MGF и измерение пролиферации с помощью включения BrdU, мечения EdU или подсчета клеток в течение 24-72 часов, демонстрирующая дозозависимое увеличение пролиферации (обычно в 2-4 раза по сравнению с контрольными образцами при оптимальных концентрациях), (2) Анализы активации сателлитных клеток: измерение перехода из покоящегося (Pax7+/MyoD-) в активированное (Pax7+/MyoD+) состояние с помощью иммунофлуоресценции или проточной цитометрии, показывающее индуцированную MGF активацию, (3) Сроки дифференцировки миобластов: обработка культур на протяжении перехода от пролиферации к дифференцировке, показывающая, что MGF поддерживает пролиферативное состояние и задерживает дифференцировку по сравнению с системным IGF-1, который способствует дифференцировке, (4) Сравнительная активность по сравнению с IGF-1: параллельное тестирование, выявляющее предпочтительную активность MGF в пролиферации сателлитных клеток по сравнению с эффектами системного IGF-1, способствующими дифференцировке, (5) Характеристика дозозависимости: установление значений EC50 для пролиферации в соответствующих типах клеток, (6) Активация сигнальных путей: вестерн-блоттинг, демонстрирующий индуцированное MGF фосфорилирование путей PI3K-Akt, MAPK-ERK (аналогично IGF-1), но, возможно, с иной кинетикой или интенсивностью, отражающей уникальный E-домен, и (7) Подтверждение идентичности варианта сплайсинга: ОТ-ПЦР или секвенирование, подтверждающее, что MGF является изоформой IGF-1Ec, а не IGF-1Ea. Сертификат анализа включает данные по пролиферации сателлитных клеток (кратность увеличения по сравнению с контролем, значения EC50) и проверку варианта сплайсинга, гарантирующую, что вы получаете подлинный MGF, а не системный IGF-1. Эти анализы подтверждают определяющую характеристику MGF: мощную активацию сателлитных клеток и пролиферацию миобластов, отличную от эффектов системного IGF-1, способствующих дифференцировке.