MGF

Обидва походять з гена IGF-1. Зрілий IGF-1 циркулює по всьому тілу та допомагає клітинам дозрівати. MGF є кінцевою частиною м'язової сплайс-форми, яка утворюється локально після навантаження або травми та підтримує поділ клітин-попередниць м'язів.

MGF розпадається протягом хвилин. PEG MGF несе великий поліетиленгліколевий ланцюг, який його захищає, тому він діє набагато довше. MGF підходить для коротких локальних сигналів; PEG MGF підходить для триваліших досліджень.

Тому що м'язи виробляють його у відповідь на механічне навантаження або пошкодження. Назва походить від групи Джеффрі Голдспінка, яка його описала.

Десять герметичних флаконів ліофілізованого MGF по 2 мг кожен, всі з однієї партії. Один звіт про партію охоплює всі десять.

Зберігайте герметичні флакони при -20°C. Після розведення зберігайте при температурі від 2 до 8°C та використовуйте протягом 14 днів. Він недовговічний у розчині, тому розводьте лише стільки, скільки потрібно для дослідження.

MGF доставляється у вигляді ліофілізованого порошку в герметичних флаконах, який залишається стабільним при кімнатній температурі під час транспортування. Кожне замовлення відправляється в простій упаковці з відстеженням, і більшість прибуває протягом 7-14 днів. Після отримання зберігайте в морозильній камері при -20°C. Сертифікат аналізу для партії, яку ми зараз відправляємо, знаходиться на нашій сторінці lab-results.

Наш MGF перевищує чистоту >98%, підтверджену ВЕРХ з комплексним контролем якості для сплайс-варіанту пептиду IGF-1Ec. Кожна партія проходить: мас-спектрометричне підтвердження молекулярної маси для повної послідовності MGF, включаючи унікальне C-кінцеве подовження домену E (молекулярна маса варіюється залежно від конкретної конструкції MGF – зазвичай повнорозмірний або біоактивний C-кінцевий фрагмент), підтвердження послідовності пептиду, що підтверджує унікальну послідовність домену E, отриману з вставки з 52 пар основ, яка відрізняє MGF від системного IGF-1Ea, ВЕРХ, що демонструє єдиний основний пік з належним часом утримування, біоаналізи проліферації клітин-сателітів, що вимірюють здатність MGF стимулювати активацію та проліферацію спокійних клітин-сателітів у первинних культурах м'язових клітин-сателітів (зазвичай з використанням міобластів C2C12 або первинних клітин-сателітів), що демонструють кратне збільшення проліферації порівняно з контрольними носіями, порівняльну біоактивність з IGF-1, що показує різні профілі активності в аналізах клітин-сателітів порівняно з диференційованими міотрубками, скринінг ендотоксинів (<0.1 EU/мг) та комплексний Сертифікат аналізу. Чистота >98% забезпечує відтворювану активацію клітин-сателітів, стабільні ефекти проліферації міобластів та надійні дослідження регенерації м'язів без перешкод від продуктів деградації або неправильних сплайс-варіантів. Всі тести підтверджують як хімічну ідентичність (правильна послідовність домену E, унікальна для MGF), так і біологічну активність (стимуляція клітин-сателітів), що є важливим для надійних досліджень відновлення та регенерації м'язів, які відрізняють MGF від інших ізоформ IGF-1.

Окрім хімічної чистоти (ВЕРХ, мас-спектрометрія підтверджує правильний сплайс-варіант IGF-1Ec з унікальною послідовністю E-домену), ми проводимо комплексні функціональні біоаналізи: (1) Аналізи проліферації клітин-супутників - обробка спокійних первинних клітин-супутників м'язів або міобластів C2C12 за допомогою MGF та вимірювання проліферації за допомогою включення BrdU, мічення EdU або підрахунку клітин протягом 24-72 годин, що демонструє дозозалежне збільшення проліферації (зазвичай у 2-4 рази порівняно з контролем на носії при оптимальних концентраціях), (2) Аналізи активації клітин-супутників - вимірювання переходу зі стану спокою (Pax7+/MyoD-) в активований стан (Pax7+/MyoD+) за допомогою імунофлуоресценції або проточної цитометрії, що показує активацію, індуковану MGF, (3) Терміни диференціювання міобластів - обробка культур протягом усього переходу від проліферації до диференціювання, що показує, що MGF підтримує проліферативний стан і затримує диференціювання порівняно із системним IGF-1, який сприяє диференціюванню, (4) Порівняльна активність проти IGF-1 - паралельне тестування, що виявляє переважну активність MGF щодо проліферації клітин-супутників порівняно з ефектами системного IGF-1, що сприяють диференціюванню, (5) Характеристика доза-відповідь - встановлення значень EC50 для проліферації у відповідних типах клітин, (6) Активація сигнальних шляхів - вестерн-блотинг, що демонструє індуковане MGF фосфорилювання шляхів PI3K-Akt, MAPK-ERK (подібно до IGF-1), але, можливо, з іншою кінетикою або величиною, що відображає унікальний E-домен, та (7) Підтвердження ідентичності сплайс-варіанта - RT-PCR або секвенування, що підтверджує, що MGF є ізоформою IGF-1Ec, а не IGF-1Ea. Сертифікат аналізу (CoA) включає дані про проліферацію клітин-супутників (кратність збільшення порівняно з контролем, значення EC50) та перевірку сплайс-варіанта, що гарантує отримання справжнього MGF, а не системного IGF-1. Ці аналізи підтверджують визначальну характеристику MGF - потужну активацію клітин-супутників та проліферацію міобластів, що відрізняється від ефектів системного IGF-1, які сприяють диференціюванню.