PEG MGF

Приєднання ланцюгів поліетиленгліколю (PEG) до пептиду або білка. Ці ланцюги захищають його від ферментів і роблять його занадто великим для швидкого виведення нирками, тому він діє набагато довше.

Нативний MGF розпадається протягом хвилин і діє там, де утворюється. PEG MGF несе ланцюг PEG 40 kDa, діє набагато довше і досягає більшої кількості тканин.

Сам ланцюг PEG важить близько 40 kDa, тоді як MGF важить близько 2,9 kDa. Разом вони важать близько 42 kDa, як зазначено в сертифікаті партії.

Десять герметичних флаконів ліофілізованого PEG MGF по 2 мг кожен, всі з однієї партії. Один звіт про партію охоплює всі десять.

Зберігайте герметичні флакони при -20°C. Після розчинення зберігайте при температурі від 2 до 8°C і використовуйте протягом 14 днів. Обережно обертайте для розчинення.

PEG MGF доставляється у вигляді ліофілізованого порошку в герметичних флаконах, який залишається стабільним при кімнатній температурі під час транспортування. Кожне замовлення відправляється в звичайній упаковці з відстеженням, і більшість прибуває протягом 7-14 днів. Після отримання зберігайте в морозильній камері при -20°C. Сертифікат аналізу для партії, яку ми зараз відправляємо, знаходиться на нашій сторінці результатів лабораторних досліджень.

Наш PEG-MGF перевищує >98% чистоти, підтвердженої ВЕРХ, з комплексним контролем якості для PEG-кон'югату. Кожна партія проходить: мас-спектрометричне підтвердження молекулярної маси для повного кон'югату PEG-MGF, включаючи як MGF (сплайс-варіант IGF-1Ec з E-доменом), так і ковалентно приєднану PEG-групу (загальна молекулярна маса ~15-50 kDa залежно від розміру PEG - значно більша, ніж у нативного MGF ~7-9 kDa), підтвердження послідовності пептиду, що підтверджує ядро MGF/IGF-1Ec з унікальним E-доменом, підтвердження PEG-кон'югації, що вимірює ступінь PEG-ування (кількість ланцюгів PEG, приєднаних на молекулу MGF) та підтверджує ковалентні зв'язки, ВЕРХ, що демонструє відповідний час утримування для PEG-модифікованих видів (відмінний від некон'югованого MGF), біоаналізи проліферації клітин-сателітів, що вимірюють здатність PEG-MGF стимулювати проліферацію міобластів (може показувати знижену активність на моль порівняно з нативним MGF через масу PEG та стеричні ефекти, але подовжену тривалість дії), порівняльну біоактивність з нативним MGF, що демонструє подовжені ефекти активації клітин-сателітів PEG-MGF, що відображають подовжений період напіввиведення, скринінг ендотоксинів (<0.1 EU/mg) та комплексний Сертифікат аналізу. Чистота >98% забезпечує відтворюване PEG-ування, постійний подовжений період напіввиведення та надійну довготривалу активацію клітин-сателітів без перешкод з боку некон'югованого MGF, вільного PEG або продуктів деградації. Всі тести підтверджують як хімічну ідентичність (ядро MGF + PEG-кон'югація), так і біологічну активність (стійка стимуляція клітин-сателітів протягом тривалого часу порівняно з гострими ефектами нативного MGF).

Окрім хімічної чистоти (ВЕРХ, що показує ПЕГільовані види з чітким часом утримання порівняно з нативним MGF), ми проводимо комплексні аналізи кон'югації та подовженої біоактивності: (1) мас-спектрометрія – підтвердження молекулярної маси кон'югату PEG-MGF (загальна маса ~15-50 кДа залежно від розміру ПЕГ), значно більшої, ніж у нативного MGF (~7-9 кДа), що демонструє успішне приєднання ПЕГ, (2) аналіз ступеня ПЕГілювання – вимірювання кількості ПЕГ-ланцюгів на молекулу MGF за допомогою зсувів мас у мас-спектрометрії та змін рухливості в SDS-PAGE, (3) характеристика сайтів кон'югації – пептидне картування, що підтверджує приєднання ПЕГ до залишків лізину або N-кінця (не до ділянок активного центру, критичних для біоактивності), (4) подовжені аналізи проліферації клітин-супутників – обробка культур міобластів одноразовою дозою PEG-MGF або нативного MGF та вимірювання проліферації протягом подовженого періоду (24-96 год), що демонструє, що PEG-MGF зберігає біоактивність довше порівняно зі швидким спадом у нативного MGF, (5) порівняльна біоактивність у часовому ході – показує, що PEG-MGF забезпечує стійку активацію клітин-супутників (клітини EdU+ Pax7+, виміряні на 24, 48, 72 год, залишаються підвищеними) порівняно з нативним MGF, який демонструє гостру активацію, що швидко знижується, (6) фармакокінетична валідація – на гризунах, вимірювання рівнів PEG-MGF у плазмі з часом, що показує подовжений період напіввиведення (години) порівняно з нативним MGF (<10 хв), (7) регенерація м'язів in vivo – моделі пошкодження, що показують, що PEG-MGF із зниженою частотою дозування (2-3 рази на тиждень) забезпечує активацію клітин-супутників, еквівалентну щоденному дозуванню нативного MGF, та (8) залежність доза-відповідь, що встановлює активність порівняно з нативним MGF. CoA включає перевірку ПЕГілювання (молекулярна маса мас-спектрометрії, ступінь кон'югації) та дані подовженої біоактивності (часовий хід проліферації клітин-супутників), що забезпечує довготривалу функцію активації клітин-супутників, відмінну від гострих ефектів нативного MGF.