PEG MGF

Es la unión de cadenas de polietilenglicol (PEG) a un péptido o proteína. Las cadenas lo protegen de las enzimas y lo hacen demasiado grande para ser eliminado rápidamente por los riñones, por lo que dura mucho más tiempo.

El MGF nativo se descompone en minutos y actúa donde se produce. El PEG MGF lleva una cadena de PEG de 40 kDa, dura mucho más y llega a más tejidos.

La cadena de PEG por sí sola pesa aproximadamente 40 kDa, mientras que el MGF pesa aproximadamente 2,9 kDa. Juntos pesan alrededor de 42 kDa, como muestra el certificado del lote.

Diez viales sellados de PEG MGF liofilizado, de 2 mg cada uno, todos del mismo lote. Un informe de lote cubre los diez.

Conserve los viales sellados a -20°C. Una vez reconstituido, manténgalo entre 2 y 8°C y utilícelo en un plazo de 14 días. Agite suavemente para disolverlo.

El PEG MGF se envía como polvo liofilizado en viales sellados, que se mantiene estable a temperatura ambiente durante el trayecto. Todos los pedidos se envían en embalaje discreto con seguimiento, y la mayoría llegan en un plazo de 7 a 14 días. Una vez recibido, consérvelo en el congelador a -20°C. El Certificado de Análisis del lote que estamos enviando actualmente está en nuestra página de resultados de laboratorio.

Nuestro PEG-MGF supera una pureza >98% verificada por HPLC con un control de calidad integral para el conjugado PEGilado. Cada lote se somete a: confirmación del peso molecular por espectrometría de masas para el conjugado PEG-MGF completo, que incluye tanto el MGF (variante de empalme IGF-1Ec con dominio E) como la fracción de PEG unida covalentemente (peso molecular total de ~15-50 kDa según el tamaño del PEG, significativamente mayor que el MGF nativo de ~7-9 kDa), verificación de la secuencia peptídica que confirma el núcleo de MGF/IGF-1Ec con el dominio E único, verificación de la conjugación con PEG que mide el grado de PEGilación (número de cadenas de PEG unidas por molécula de MGF) y confirma los enlaces covalentes, HPLC que demuestra un tiempo de retención adecuado para la especie PEGilada (diferente del MGF no conjugado), bioensayos de proliferación de células satélite que miden la capacidad del PEG-MGF para estimular la proliferación de mioblastos (puede mostrar una potencia reducida por mol en comparación con el MGF nativo debido a la masa del PEG y los efectos estéricos, pero una duración de acción prolongada), bioactividad comparativa frente al MGF nativo que muestra los efectos prolongados de activación de células satélite del PEG-MGF, lo que refleja una semivida extendida, detección de endotoxinas (<0,1 EU/mg) y un Certificado de Análisis completo. La pureza >98% garantiza una PEGilación reproducible, una semivida prolongada constante y una activación fiable y duradera de las células satélite sin interferencias del MGF no conjugado, PEG libre o productos de degradación. Todas las pruebas validan tanto la identidad química (núcleo de MGF + conjugación con PEG) como la actividad biológica (estimulación sostenida de las células satélite durante un tiempo prolongado frente a los efectos agudos del MGF nativo).

Más allá de la pureza química (HPLC que muestra especies pegiladas con retención distinta frente al MGF nativo), realizamos ensayos integrales de conjugación y bioactividad extendida: (1) Espectrometría de masas, que confirma el peso molecular del conjugado PEG-MGF (masa total de ~15-50 kDa según el tamaño del PEG) significativamente mayor que el del MGF nativo (~7-9 kDa), lo que demuestra una unión exitosa del PEG, (2) Análisis del grado de pegilación, que mide el número de cadenas de PEG por molécula de MGF mediante cambios de masa en espectrometría de masas y movilidad en SDS-PAGE, (3) Caracterización del sitio de conjugación, con mapeo peptídico que confirma que el PEG se une a residuos de lisina o al extremo N-terminal (no a regiones del sitio activo críticas para la bioactividad), (4) Ensayos extendidos de proliferación de células satélite, tratando cultivos de mioblastos con una dosis única de PEG-MGF o MGF nativo y midiendo la proliferación durante un período prolongado (24-96 h), lo que demuestra que PEG-MGF mantiene la bioactividad durante más tiempo frente al rápido declive del MGF nativo, (5) Bioactividad comparativa en el tiempo, que muestra que PEG-MGF produce una activación sostenida de células satélite (células EdU+ Pax7+ medidas a las 24 h, 48 h y 72 h permanecen elevadas) frente al MGF nativo que muestra una activación aguda que disminuye rápidamente, (6) Validación farmacocinética, en modelos de roedores, midiendo los niveles plasmáticos de PEG-MGF a lo largo del tiempo, mostrando una vida media extendida (horas) frente al MGF nativo (<10 min), (7) Regeneración muscular in vivo, con modelos de lesión que muestran que PEG-MGF con una frecuencia de dosificación reducida (2-3 veces/semana) produce una activación de células satélite equivalente a la dosificación diaria con MGF nativo, y (8) Curva dosis-respuesta que establece la potencia frente al MGF nativo. El CoA incluye verificación de pegilación (peso molecular por espectrometría de masas, grado de conjugación) y datos de bioactividad extendida (curso temporal de proliferación sostenida de células satélite), lo que garantiza una funcionalidad de activación de células satélite de acción prolongada distinta de los efectos agudos del MGF nativo.