PEG MGF

A fixação de cadeias de polietilenoglicol (PEG) a um peptídeo ou proteína. As cadeias o protegem de enzimas e o tornam grande demais para ser eliminado rapidamente pelos rins, prolongando sua duração de forma significativa.

O MGF nativo se degrada em minutos e age onde é produzido. O PEG MGF carrega uma cadeia de PEG de 40 kDa, dura muito mais tempo e atinge mais tecidos.

A cadeia de PEG sozinha tem cerca de 40 kDa, enquanto o MGF tem cerca de 2,9 kDa. Juntos, pesam aproximadamente 42 kDa, conforme demonstrado no certificado do lote.

Dez frascos lacrados de PEG MGF liofilizado, 2 mg cada, todos do mesmo lote. Um relatório de lote cobre todos os dez.

Mantenha os frascos lacrados a -20°C. Uma vez reconstituído, conserve entre 2 e 8°C e utilize em até 14 dias. Agite suavemente para dissolver.

O PEG MGF é enviado como pó liofilizado em frascos lacrados, que permanece estável em temperatura ambiente durante o transporte. Cada pedido sai em embalagem discreta com rastreamento, e a maioria chega em 7 a 14 dias. Armazene no congelador a -20°C assim que chegar. O Certificado de Análise do lote que estamos enviando atualmente está em nossa página de resultados laboratoriais.

Nosso PEG-MGF excede >98% de pureza verificada por HPLC com controle de qualidade abrangente para o conjugado PEGuilado. Cada lote é submetido a: confirmação do peso molecular por espectrometria de massas para o conjugado completo PEG-MGF, incluindo tanto o MGF (variante de splicing IGF-1Ec com domínio E) quanto a porção PEG covalentemente ligada (peso molecular total ~15-50 kDa dependendo do tamanho do PEG - significativamente maior que o MGF nativo ~7-9 kDa), verificação da sequência peptídica confirmando o núcleo MGF/IGF-1Ec com domínio E único, verificação da conjugação de PEG medindo o grau de PEGuilação (número de cadeias de PEG ligadas por molécula de MGF) e confirmando ligações covalentes, HPLC demonstrando tempo de retenção adequado para a espécie PEGuilada (diferente do MGF não conjugado), bioensaios de proliferação de células satélite medindo a capacidade do PEG-MGF de estimular a proliferação de mioblastos (pode mostrar potência reduzida por mol em comparação ao MGF nativo devido à massa de PEG e efeitos estéricos, mas duração de ação prolongada), bioatividade comparativa vs MGF nativo mostrando os efeitos prolongados de ativação de células satélite do PEG-MGF refletindo meia-vida estendida, triagem de endotoxinas (<0,1 EU/mg) e Certificado de Análise abrangente. A pureza >98% garante PEGuilação reprodutível, meia-vida estendida consistente e ativação confiável e duradoura de células satélite sem interferência de MGF não conjugado, PEG livre ou produtos de degradação. Todos os testes validam tanto a identidade química (núcleo MGF + conjugação PEG) quanto a atividade biológica (estimulação sustentada de células satélite por tempo prolongado em comparação aos efeitos agudos do MGF nativo).

Além da pureza química (HPLC mostrando espécies PEGiladas com retenção distinta em relação ao MGF nativo), realizamos ensaios abrangentes de conjugação e bioatividade estendida: (1) Espectrometria de massas - confirmando o peso molecular do conjugado PEG-MGF (massa total ~15-50 kDa dependendo do tamanho do PEG) significativamente maior que o MGF nativo (~7-9 kDa), demonstrando a ligação bem-sucedida do PEG, (2) Análise do grau de PEGilação - medindo o número de cadeias de PEG por molécula de MGF por meio de mudanças de massa na espectrometria de massas e alterações de mobilidade em SDS-PAGE, (3) Caracterização do local de conjugação - mapeamento peptídico confirmando que o PEG está ligado a resíduos de lisina ou ao N-terminal (não em regiões do sítio ativo críticas para a bioatividade), (4) Ensaios estendidos de proliferação de células satélite - tratando culturas de mioblastos com dose única de PEG-MGF ou MGF nativo e medindo a proliferação ao longo de um período estendido (24-96h), demonstrando que o PEG-MGF mantém a bioatividade por mais tempo em comparação com o declínio rápido do MGF nativo, (5) Bioatividade comparativa ao longo do tempo - mostrando que o PEG-MGF produz ativação sustentada de células satélite (células EdU+ Pax7+ medidas em 24h, 48h, 72h permanecem elevadas) em comparação com o MGF nativo, que mostra ativação aguda com declínio rápido, (6) Validação farmacocinética - em modelos de roedores, medindo os níveis plasmáticos de PEG-MGF ao longo do tempo, mostrando meia-vida estendida (horas) em comparação com o MGF nativo (<10 min), (7) Regeneração muscular in vivo - modelos de lesão mostrando que o PEG-MGF com frequência de dosagem reduzida (2-3x/semana) produz ativação de células satélite equivalente à dosagem diária de MGF nativo, e (8) Dose-resposta estabelecendo a potência em relação ao MGF nativo. O CoA inclui verificação de PEGilação (peso molecular por espectrometria de massas, grau de conjugação) e dados de bioatividade estendida (curso temporal de proliferação sustentada de células satélite), garantindo funcionalidade de ativação de células satélite de longa duração distinta dos efeitos agudos do MGF nativo.