PEG MGF

Proses penempelan rantai polietilena glikol (PEG) pada suatu peptida atau protein. Rantai tersebut melindunginya dari enzim dan membuatnya terlalu besar untuk dibersihkan dengan cepat oleh ginjal, sehingga bertahan jauh lebih lama.

MGF alami terurai dalam hitungan menit dan bekerja di tempat ia diproduksi. PEG MGF membawa rantai PEG 40 kDa, bertahan jauh lebih lama, dan mencapai lebih banyak jaringan.

Rantai PEG saja memiliki berat sekitar 40 kDa, sedangkan MGF sekitar 2,9 kDa. Bersama-sama beratnya sekitar 42 kDa, seperti yang ditunjukkan pada sertifikat bets.

Sepuluh vial tertutup berisi PEG MGF beku-kering, masing-masing 2 mg, semuanya dari satu bets. Satu laporan bets mencakup kesepuluh vial tersebut.

Simpan vial yang masih tertutup pada suhu -20°C. Setelah dilarutkan, simpan pada suhu 2 hingga 8°C dan gunakan dalam waktu 14 hari. Putar perlahan untuk melarutkannya.

PEG MGF dikirim sebagai bubuk beku-kering dalam vial tertutup, yang tetap stabil pada suhu kamar selama perjalanan. Setiap pesanan dikirim dalam kemasan polos dengan nomor pelacakan, dan sebagian besar tiba dalam 7 hingga 14 hari. Simpan di freezer pada suhu -20°C setelah tiba. Sertifikat Analisis untuk bets yang kami kirimkan sekarang tersedia di halaman hasil lab kami.

PEG-MGF kami memiliki kemurnian >98% yang diverifikasi oleh HPLC dengan kontrol kualitas yang komprehensif untuk konjugat terPEGilasi. Setiap bets menjalani: konfirmasi berat molekul spektrometri massa untuk konjugat PEG-MGF lengkap termasuk MGF (varian sambatan IGF-1Ec dengan domain E) dan bagian PEG yang terikat secara kovalen (berat molekul total ~15-50 kDa tergantung ukuran PEG - secara signifikan lebih besar dari MGF alami ~7-9 kDa), verifikasi urutan peptida yang mengonfirmasi inti MGF/IGF-1Ec dengan domain E yang unik, verifikasi konjugasi PEG yang mengukur derajat PEGilasi (jumlah rantai PEG yang terikat per molekul MGF) dan mengonfirmasi ikatan kovalen, HPLC yang menunjukkan waktu retensi yang tepat untuk spesies terPEGilasi (berbeda dari MGF yang tidak terkonjugasi), bioassay proliferasi sel satelit yang mengukur kemampuan PEG-MGF untuk merangsang proliferasi mioblas (mungkin menunjukkan potensi per mol yang berkurang dibandingkan MGF alami karena massa PEG dan efek sterik, tetapi durasi kerja yang diperpanjang), bioaktivitas komparatif vs MGF alami yang menunjukkan efek pengaktifan sel satelit yang berkepanjangan dari PEG-MGF yang mencerminkan waktu paruh yang diperpanjang, skrining endotoksin (<0,1 EU/mg), dan Sertifikat Analisis yang komprehensif. Kemurnian >98% memastikan PEGilasi yang dapat direproduksi, waktu paruh yang diperpanjang secara konsisten, dan aktivasi sel satelit kerja panjang yang andal tanpa gangguan dari MGF yang tidak terkonjugasi, PEG bebas, atau produk degradasi. Semua pengujian memvalidasi identitas kimia (inti MGF + konjugasi PEG) dan aktivitas biologis (stimulasi sel satelit yang berkelanjutan dalam waktu yang diperpanjang vs efek akut MGF alami).

Melampaui kemurnian kimia (HPLC yang menunjukkan spesies terPEGilasi dengan retensi yang berbeda dibandingkan MGF asli), kami melakukan uji konjugasi komprehensif dan uji bioaktivitas yang diperluas: (1) Spektrometri massa - mengonfirmasi berat molekul untuk konjugat PEG-MGF (total massa ~15-50 kDa tergantung ukuran PEG) yang secara signifikan lebih besar daripada MGF asli (~7-9 kDa), menunjukkan keberhasilan penempelan PEG, (2) Analisis derajat PEGilasi - mengukur jumlah rantai PEG per molekul MGF melalui pergeseran massa spektrometri massa dan perubahan mobilitas SDS-PAGE, (3) Karakterisasi situs konjugasi - pemetaan peptida yang mengonfirmasi PEG menempel pada residu lisin atau ujung-N (bukan wilayah situs aktif yang penting untuk bioaktivitas), (4) Uji proliferasi sel satelit yang diperluas - merawat kultur mioblas dengan dosis tunggal PEG-MGF atau MGF asli dan mengukur proliferasi selama periode waktu yang diperpanjang (24-96 jam), menunjukkan PEG-MGF mempertahankan bioaktivitas lebih lama dibandingkan penurunan cepat MGF asli, (5) Uji bioaktivitas kurva waktu komparatif - menunjukkan PEG-MGF menghasilkan aktivasi sel satelit yang berkelanjutan (sel EdU+ Pax7+ diukur pada 24 jam, 48 jam, 72 jam tetap meningkat) dibandingkan MGF asli yang menunjukkan aktivasi akut yang menurun dengan cepat, (6) Validasi farmakokinetik - pada model hewan pengerat, mengukur kadar PEG-MGF plasma dari waktu ke waktu menunjukkan waktu paruh yang diperpanjang (jam) dibandingkan MGF asli (<10 menit), (7) Regenerasi otot in vivo - model cedera menunjukkan PEG-MGF dengan frekuensi dosis yang dikurangi (2-3x/minggu) menghasilkan aktivasi sel satelit yang setara dengan pemberian MGF asli harian, dan (8) Respons dosis yang menetapkan potensi dibandingkan MGF asli. CoA mencakup verifikasi PEGilasi (berat molekul spektrometri massa, derajat konjugasi) dan data bioaktivitas yang diperluas (kurva waktu proliferasi sel satelit yang berkelanjutan) yang memastikan fungsi aktivasi sel satelit yang bekerja lama yang berbeda dari efek akut MGF asli.