ไธม์โมซิน อัลฟา-1 (Thymosin Alpha-1)

ใช่ ไธมาลฟาซิน (Thymalfasin) เป็นชื่อยาของไธโมซิน อัลฟา-1 (Thymosin alpha-1) สังเคราะห์ ซึ่งมีกรดอะมิโน 28 ตัวเหมือนกัน โดยมีหมู่อะเซทิล (acetyl group) อยู่ที่ปลายด้าน N

ไม่ได้รับการอนุมัติในสหรัฐอเมริกา ได้รับการอนุมัติในชื่อ Zadaxin ในหลายประเทศในเอเชียและยุโรป Lyze จัดหาเพื่อการวิจัยในห้องปฏิบัติการเท่านั้น

แม้จะมีชื่อคล้ายกัน แต่ทั้งสองชนิดไม่เกี่ยวข้องกัน อัลฟา-1 (Alpha-1) เป็นเปปไทด์ภูมิคุ้มกันที่มีกรดอะมิโน 28 ตัว ส่วนเบตา-4 (Beta-4) ซึ่งจำหน่ายในชื่อ TB-500 เป็นเปปไทด์ที่มีกรดอะมิโน 43 ตัวที่ควบคุมแอคติน (actin) และการเคลื่อนที่ของเซลล์

ไธโมซิน อัลฟา-1 (Thymosin alpha-1) ตามธรรมชาติมีหมู่อะเซทิล (acetyl group) อยู่ที่ปลายด้าน N ซึ่งช่วยป้องกันการสลายตัว ใบรับรองของเราจะแสดงรูปแบบที่มีอะเซทิล (acetylated form)

ประกอบด้วยไธโมซิน อัลฟา-1 (Thymosin alpha-1) แบบแห้งเยือกแข็ง (freeze-dried) จำนวน 10 ขวดที่ปิดผนึก จากล็อตการผลิตเดียวกัน ขวดละ 5 mg หรือ 10 mg รายงานล็อตการผลิตหนึ่งฉบับครอบคลุมทั้ง 10 ขวด

ไธโมซิน อัลฟา-1 (Thymosin Alpha-1) จัดส่งในรูปแบบผงแห้งเยือกแข็งในขวดที่ปิดผนึก ซึ่งคงตัวที่อุณหภูมิห้องระหว่างการขนส่ง ทุกคำสั่งซื้อจะจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ธรรมดาพร้อมหมายเลขติดตาม และส่วนใหญ่จะถึงภายใน 7 ถึง 14 วัน เมื่อได้รับแล้วให้เก็บในช่องแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20°C ใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) สำหรับล็อตที่กำลังจัดส่งอยู่ในขณะนี้อยู่ที่หน้า lab-results ของเรา

ไธโมซิน อัลฟา-1 (Thymosin Alpha-1) ของเรามีความบริสุทธิ์เกิน >98% ซึ่งได้รับการยืนยันโดย reverse-phase HPLC ที่แสดงเวลาในการคงอยู่ (retention time) ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของลำดับกรดอะมิโน 28 ตัวที่มี N-terminal acetylation แต่ละล็อตการผลิตผ่านการควบคุมคุณภาพอย่างครอบคลุม: การยืนยันมวลโมเลกุล (~3108 Da) ด้วย mass spectrometry ซึ่งตรวจสอบลำดับ Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn ที่สมบูรณ์, การหาลำดับเปปไทด์ด้วย MS/MS fragmentation หรือ Edman degradation ซึ่งยืนยันกรดอะมิโนแต่ละตัวและที่สำคัญคือยืนยัน N-terminal acetylation (หมู่อะเซทิล = +42 Da; Tα1 ที่ไม่มีอะเซทิลจะมีฤทธิ์ทางชีวภาพที่เปลี่ยนแปลงและการสลายตัวที่เร็วกว่า), การวิเคราะห์องค์ประกอบของกรดอะมิโนซึ่งวัดปริมาณกรดอะมิโนแต่ละตัวเพื่อยืนยันความถูกต้องของลำดับ, การทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพเชิงหน้าที่ซึ่งวัดกิจกรรมทางภูมิคุ้มกันรวมถึงการทดสอบ dendritic cell maturation โดยการรักษา immature DCs (ที่ได้จาก monocyte หรือ bone marrow) ด้วย Tα1 ในขนาดที่เพิ่มขึ้นและวัดการเพิ่มขึ้นของ CD80/CD86/MHC-II ด้วย flow cytometry พร้อมกับการหลั่ง IL-12 ด้วย ELISA ซึ่งแสดงการกระตุ้น DC พร้อมการวัด EC50, การทดสอบการผลิต Th1 cytokine โดยใช้ peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) หรือ splenocytes ที่รักษาด้วย Tα1 และวัดการผลิต IFN-γ, IL-2, TNF-α ด้วย multiplex cytokine assays หรือ ELISA ซึ่งยืนยันฤทธิ์ Th1-polarizing, การทดสอบ TLR reporter โดยใช้ HEK293 cells ที่แสดง TLR2 หรือ TLR9 อย่างคงที่พร้อมกับ NF-κB-luciferase reporters และวัด luciferase activity ที่เกิดจาก Tα1 ซึ่งยืนยันการทำงานของ TLR agonist, การทดสอบ NK cell cytotoxicity ซึ่งแสดงว่า Tα1 เพิ่มการทำลายเซลล์เป้าหมายที่อาศัย NK cell โดยวัดด้วย chromium release หรือ calcein-AM release assays, การทดสอบ T-cell proliferation ซึ่งแสดงว่า Tα1 เพิ่มการขยายตัวของ T-cell ที่ถูกกระตุ้นด้วย mitogen, การทดสอบเอนโดทอกซิน (<0.1 EU/mg โดย LAL assay) และใบรับรองการวิเคราะห์ (Certificate of Analysis) ที่ครอบคลุม N-terminal acetylation มีความสำคัญต่อฤทธิ์ทางชีวภาพและความต้านทานต่อโปรตีเอส การควบคุมคุณภาพยืนยัน acetylation ผ่าน mass spec (ความแตกต่างของมวล) และ Edman sequencing (N-terminus ที่มีอะเซทิลจะบล็อกรอบแรก) เพื่อให้การวิจัยสามารถทำซ้ำได้สูงสุด เราแนะนำให้ละลายในน้ำปลอดเชื้อหรือ PBS โดยหลีกเลี่ยง acetate buffers ซึ่งอาจรบกวนการวิเคราะห์ N-terminal acetyl group หากนักวิจัยทำการตรวจสอบด้วยตนเอง