TB-500 (Thymosin Beta 4)

TB-500 của Lyze là chuỗi thymosin beta-4 đầy đủ: 43 axit amin, được acetyl hóa ở đầu N, khoảng 4963 g/mol, như chứng chỉ lô hàng cho thấy. Một số người bán bán một đoạn 7 axit amin dưới cùng tên gọi, đó là một phân tử khác.

Nó giữ các đơn vị actin riêng lẻ và kiểm soát khi nào chúng kết hợp thành sợi. Đó là cách tế bào thay đổi hình dạng và di chuyển, vì vậy nó được nghiên cứu ở bất cứ nơi nào tế bào cần di chuyển vào mô bị tổn thương.

TB-500 kiểm soát actin và chuyển động của tế bào. BPC-157 hoạt động chủ yếu thông qua sự phát triển mạch máu và sự sống sót của tế bào. Chúng tác động lên các bước sửa chữa khác nhau, đó là lý do tại sao chúng thường được nghiên cứu cùng nhau, dưới dạng hai bộ hoặc một hỗn hợp.

Mười lọ kín chứa TB-500 đông khô, tất cả từ một lô, với hàm lượng 2 mg, 5 mg hoặc 10 mg mỗi lọ. Một báo cáo lô bao gồm tất cả mười lọ. Nước diệt khuẩn được bán riêng.

Giữ các lọ kín ở -20°C để bảo quản lâu dài, hoặc trong tủ lạnh để sử dụng trong thời gian ngắn. Sau khi pha, giữ ở 2 đến 8°C và sử dụng trong vòng 14 ngày. Xoay nhẹ để hòa tan; không lắc.

TB-500 (Thymosin Beta 4) được vận chuyển dưới dạng bột đông khô trong lọ kín, giữ ổn định ở nhiệt độ phòng trong suốt hành trình. Mỗi đơn hàng được gửi trong bao bì trơn có mã theo dõi, và hầu hết đến trong vòng 7 đến 14 ngày. Bảo quản trong tủ đông ở -20°C khi nhận được. Giấy chứng nhận phân tích cho lô chúng tôi đang giao có trên trang kết quả phòng thí nghiệm của chúng tôi.

TB500 của chúng tôi vượt quá độ tinh khiết >98% được xác nhận bằng phân tích HPLC với kiểm soát chất lượng toàn diện cho peptide 43 axit amin. Mỗi lô trải qua: xác nhận khối lượng phân tử bằng khối phổ cho chuỗi Thymosin Beta 4 hoàn chỉnh (khối lượng phân tử ~4963 Da), xác minh trình tự peptide xác nhận tất cả 43 axit amin bao gồm vùng liên kết actin quan trọng (gốc 17-28), HPLC cho thấy một đỉnh chính duy nhất với thời gian lưu thích hợp và các sản phẩm phân hủy tối thiểu, xét nghiệm liên kết actin đo khả năng cô lập G-actin và ngăn ngừa trùng hợp của TB500 (định lượng qua xét nghiệm trùng hợp pyrene-actin cho thấy ức chế phụ thuộc liều), xét nghiệm sinh học di chuyển tế bào sử dụng xét nghiệm chữa lành vết xước/vết thương trong lớp đơn bào nguyên bào sợi hoặc tế bào nội mô cho thấy tốc độ di chuyển tăng cường, xét nghiệm tăng sinh cho thấy tăng sinh tế bào ở các loại tế bào thích hợp, sàng lọc nội độc tố (<0.1 EU/mg bằng xét nghiệm LAL), và Giấy chứng nhận phân tích toàn diện. Độ tinh khiết >98% đảm bảo hoạt tính liên kết actin có thể tái lập, hiệu ứng di chuyển tế bào nhất quán và các đặc tính tạo mạch đáng tin cậy mà không bị nhiễu từ các sản phẩm phân hủy hoặc trình tự không chính xác. Tất cả các thử nghiệm đều xác nhận cả danh tính hóa học (trình tự 43-AA chính xác, khối lượng phân tử phù hợp) và hoạt tính sinh học (cô lập actin, kích thích di chuyển tế bào) cần thiết cho nghiên cứu chữa lành vết thương và tái tạo đáng tin cậy.

Ngoài độ tinh khiết hóa học (HPLC, khối phổ xác nhận trình tự 43 axit amin chính xác), chúng tôi thực hiện các xét nghiệm sinh học chức năng toàn diện: (1) Xét nghiệm trùng hợp actin gắn pyrene - đo khả năng ngăn chặn sự trùng hợp G-actin của TB500 bằng cách theo dõi sự giảm huỳnh quang (huỳnh quang actin gắn pyrene tăng lên khi trùng hợp thành F-actin; TB500 cô lập G-actin ngăn chặn sự tăng này), chứng minh ức chế phụ thuộc liều với giá trị IC50 xác nhận ái lực liên kết actin, (2) Xét nghiệm chữa lành vết thương/vết trầy - tạo vết trầy tiêu chuẩn trong lớp tế bào sợi (NIH-3T3) hoặc nội mô (HUVEC) hợp lưu, xử lý bằng TB500 và đo độ đóng khoảng trống trong 24-48 giờ qua kính hiển vi cho thấy sự di chuyển tăng tốc vào vùng vết thương so với đối chứng, (3) Xét nghiệm di chuyển Transwell - đo sự di chuyển hóa ứng động do TB500 gây ra qua màng xốp về phía gradient hóa ứng động, (4) Xét nghiệm tăng sinh tế bào - hấp thu MTT hoặc BrdU chứng minh tăng sinh ở tế bào xử lý TB500, (5) Hình ảnh bộ xương tế bào actin - nhuộm phalloidin tiết lộ tác động của TB500 lên sự hình thành lamellipodia, tổ chức sợi ứng suất và hình thái tế bào, (6) Xét nghiệm hình thành ống - tế bào nội mô trên Matrigel cho thấy sự hình thành ống/mạng lưới mạch máu do TB500 thúc đẩy, chỉ ra hoạt tính sinh học tạo mạch, và (7) Kích hoạt đường truyền tín hiệu - Western blot chứng minh quá trình phosphoryl hóa Akt, ERK1/2 và FAK do TB500 gây ra, xác nhận tín hiệu qua trung gian integrin. CoA bao gồm dữ liệu liên kết actin (giá trị IC50 pyrene-actin) và hoạt tính sinh học di chuyển tế bào (tăng gấp nhiều lần trong việc đóng vết thương so với đối chứng) đảm bảo hoạt động sửa chữa mô có liên quan sinh lý.