加雷妥单抗 (Garetosmab)

Garetosmab (REGN2477) 研究指南

什么是加瑞妥单抗（Garetosmab）？

加瑞妥单抗（Garetosmab）是一种全人源IgG4单克隆抗体，可结合并中和激活素A。其开发代码为REGN2477。它由再生元（Regeneron）在VelocImmune平台上生成，该平台与Trevogrumab背后的全人源抗体平台相同。

关键标识：CAS 2097125-54-5，约145.5 kDa，IgG4同型。在中国仓鼠卵巢细胞中表达，并通过蛋白A亲和层析纯化。

加瑞妥单抗（Garetosmab）不是肽。 它是一种四链免疫球蛋白，由两条重链和两条轻链组成，通过二硫键连接并发生N-糖基化。肽合成无法生产该物质，肽证书也无法对其进行表征。

Garetosmab 的作用机制是什么？

激活素 A 是 TGF-β 超家族配体，由两个抑制素 β-A 亚基组成的同源二聚体。它通过激活素 II 型受体 ActRIIA 和 ActRIIB（与 ALK4 配对）传导信号，驱动 SMAD2 和 SMAD3 磷酸化。

Garetosmab 是一种配体陷阱：它结合激活素 A 并阻断受体结合。

其价值在于这种结合的特异性。Garetosmab 结合并抑制含有抑制素 β-A 亚基的激活素，即激活素 A、激活素 AB 和激活素 AC。它不结合或功能性抑制：

• 激活素 B
• 抑制素 A
• BMP-2、BMP-6、BMP-9、BMP-10
• GDF8（肌生成抑制素）
• GDF11

为什么激活素A的选择性很难实现，而这又为何重要？

TGF-β超家族是一个受体空间拥挤的系统。激活素A、激活素B、肌生成抑制蛋白、GDF11以及若干种BMP蛋白汇聚在一小组共享的I型和II型受体上，并驱动相同的SMAD转录机制。一种能同时结合其中四种配体的工具，其产生的表型无法通过任何下游检测加以分解。

Garetosmab将作用界限划定在配体层面而非受体层面。它在模型中产生的任何效应都可归因于激活素A、AB或AC，而与该列表上的其他配体无关。对于必须在同一组织中区分激活素信号与BMP信号的设计而言，这种选择性正是该试剂的核心价值所在。

FOP与ACVR1研究背景是什么？

再生元科学家发现激活素A是导致进行性骨化性纤维发育不良（FOP）中异位骨化的驱动因素。FOP是一种超罕见疾病，其突变的ACVR1受体将激活素A误读为成骨信号。在健康组织中，激活素A不会驱动骨形成；而在FOP中，突变受体将其转化为骨形成输入信号。

在已报告的2期研究中，与安慰剂组（出现19个新病灶，对应1至2个新病灶）相比，加瑞妥单抗将新发异位骨化病灶减少了90%至94%。

美国食品药品监督管理局于2017年授予其快速通道资格，并在3期OPTIMA试验后，于2026年8月19日批准加瑞妥单抗（商品名Pasatru）用于成人FOP患者。此处提供的材料为研究试剂，与任何临床供应链无关。

COURAGE试验揭示了加瑞托单抗的哪些信息，包括其耐受性？

加瑞托单抗是再生元公司COURAGE肥胖症2期试验（NCT06299098）中的第三种药物，在司美格鲁肽和特雷沃格鲁单抗的基础上加用。研究结果已在2025年EASD会议上公布。

第26周时瘦体重相对于基线的变化：

• 单用司美格鲁肽：-6.5%
• 司美格鲁肽+特雷沃格鲁单抗（两种剂量）：-3.3%和-3.8%
• 司美格鲁肽+特雷沃格鲁单抗+加瑞托单抗：-2.0%

三联疗法实现了80.9%的瘦体重保留率，脂肪量减少幅度较单用司美格鲁肽增加27.3%，是该研究中体成分改善最显著的结果。

但该疗法的耐受性也最差。司美格鲁肽联合特雷沃格鲁单抗总体耐受性良好，而三联疗法的因耐受性和其他不良事件导致的停药率显著更高。在任一治疗组中发生率至少为5%的不良事件包括：肌肉痉挛、恶心、便秘、疲劳、腹泻、头痛、呕吐、胃食管反流、上呼吸道感染、鼻咽炎、尿路感染、流感和COVID-19。

这种权衡（同一治疗组中体成分改善最佳但停药率最高）是关于该化合物最值得了解的一点，也是激活素A阻断被作为附加疗法而非默认方案的原因。

研究应用

• 激活素A通路药理学及配体选择性中和
• 需要将激活素与BMP信号输入分离的SMAD2和SMAD3信号研究
• ACVR1及异位骨化研究模型
• 肌肉和代谢研究，其中激活素A是除肌生成抑制蛋白外的第二个ActRII配体
• 与Trevogrumab配对研究，以在同一模型中解析激活素A和肌生成抑制蛋白的贡献
• 与非选择性方法（如卵泡抑素或可溶性ActRIIB-Fc诱饵）的对比工作，这些方法同时结合激活素A和肌生成抑制蛋白，无法将两者分离
• 抗体处理、制剂及稳定性方法开发

为什么要同时使用加瑞托单抗（Garetosmab）和特雷伏单抗（Trevogrumab）？

肌生成抑制蛋白（Myostatin）和激活素A（Activin A）是限制骨骼肌质量的两种主要ActRII配体，它们通过重叠的受体进入相同的SMAD信号通路。阻断其中一种会使另一种保持完整，这就是为什么在这一领域中，单配体阻断的结果通常小于受体水平阻断所预测的效果。

COURAGE研究是最清晰的例证：单用特雷伏单抗（Trevogrumab）使瘦体重损失从-6.5%降至-3.3%，而加用加瑞托单抗（Garetosmab）则进一步降至-2.0%。同时单独使用和联合使用这两种抗体，是将ActRII阻断表型归因于两种配体的标准设计。由于这两种抗体不会与对方的靶标发生交叉反应，因此联合使用是真正的叠加效应，而非混杂效应。

关于这两种药物与受体水平和前体形式选择性方法的比较，请参阅肌生成抑制蛋白抑制剂比较指南。

抗体与多肽的检测方法有何不同？

多肽检测报告通常包括反相高效液相色谱纯度、电喷雾电离质谱电荷态以及卡尔费休水分测定。但对于一个145 kDa的糖蛋白而言，这些检测方法均不适用：反相条件会使分子变性，单一电荷态的质量在聚糖异质性群体中毫无意义，且关键杂质并非合成副产物。

抗体检测项目包括：

• 单体纯度（体积排阻高效液相色谱）：聚集是首要的质量风险
• 聚集体含量（体积排阻高效液相色谱）：与单体峰分别定量
• 鉴定及链完整性（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，还原与非还原条件）：完整状态下约150 kDa；还原后约50 kDa和25 kDa
• 鉴定（去糖基化完整质量）：适用于糖基化蛋白的质量检测方法
• 结合活性（酶联免疫吸附试验，针对固定化激活素A）：纯化但无活性即为不合格批次
• 选择性（配体家族交叉筛选）：这是购买该化合物的目的所在
• 内毒素（鲎试剂检测）：哺乳动物细胞培养产物
• 浓度（紫外吸收A280）：需报告，而非假设值

操作与储存

• 冻干态，未开封：2至8摄氏度，24个月
• 温和复溶：稀释液沿瓶壁注入，轻轻旋动，切勿涡旋或振摇
• 复溶后：2至8摄氏度下最多4周，或分装单次用量后置于零下80摄氏度
• 冷冻前分装：反复冻融是导致聚集的主要因素
• 避免产生泡沫和不必要的转移：气液界面会使抗体变性

质量标准

• 单体纯度：SEC-HPLC检测纯度达98%或以上，聚集体单独报告
• 表达系统：CHO哺乳动物细胞培养，经蛋白A纯化
• 内毒素：LAL检测内毒素低于1.0 EU/mg
• 剂型：从组氨酸和蔗糖基质中冻干，分装于单次使用小瓶
• 文件：批次匹配的抗体分析证书发布于/lab-results
• 装量规格：0.1 mg、1 mg、5 mg、10 mg及100 mg，按瓶计价

仅供实验室研究用途。不可用于人类消费、治疗用途或任何人体体内应用。Garetosmab（加雷托斯单抗）在美国仅作为药物Pasatru获批；此处提供的材料为研究试剂，并非该药物。